中国脊柱脊髓杂志
中國脊柱脊髓雜誌
중국척주척수잡지
CHINESE JOURNAL OF SPINE AND SPINAL CORD
2012年
11期
1028-1035
,共8页
韩晓光%杨宁%崔岳毅%党耕町%徐迎胜%宋纯理
韓曉光%楊寧%崔嶽毅%黨耕町%徐迎勝%宋純理
한효광%양저%최악의%당경정%서영성%송순리
脊髓损伤%辛伐他汀%骨髓间充质干细胞%归巢%大鼠
脊髓損傷%辛伐他汀%骨髓間充質榦細胞%歸巢%大鼠
척수손상%신벌타정%골수간충질간세포%귀소%대서
目的:观察辛伐他汀动员骨髓间充质干细胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)归巢至脊髓损伤部位对损伤脊髓的修复作用,并探讨其相关机制.方法:成年雌性SD大鼠30只,经尾静脉注射移植大鼠转绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因的BMSCs,24h后随机分为3组:假手术组,仅切除椎板,不损伤脊髓;对照组,脊髓损伤后经蛛网膜下腔注射载体;实验组,脊髓损伤后经蛛网膜下腔注射辛伐他汀.每组10只.对照组和实验组采用改良Allen法(40g· cm)制作T9～T10节段脊髓损伤模型,从L4水平蛛网膜下腔注射辛伐他汀(5mg/kg)或载体.术前及术后1d、3d、7d、14d、21d、28d时盲法进行BBB评分和斜板试验;术后28d处死大鼠,取相应节段脊髓组织行形态计量学观察脊髓空腔体积大小;应用神经元核抗原(NeuN)/神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)与GFP免疫荧光双染法观察移植GFP-BMSCs的迁移及细胞分化情况;Western blot检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及脑源性神经营养因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)表达水平的变化.结果:术后各时间点假手术组动物BBB评分及斜板试验角度无明显变化,实验组及对照组BBB评分及斜板试验角度明显降低,术后7d、14d、21d、28d时实验组BBB评分高于对照组(P＜0.05);术后14d、21d、28d时实验组大鼠的斜板试验角度高于对照组(P＜0.05).术后28d时假手术组脊髓内未见空腔,实验组和对照脊髓损伤部位均可见空洞形成,实验组空腔体积(0.29±0.08mm3)小于对照组(0.57±0.10mm3)(P＜0.05);荧光显微镜下观察实验组在脊髓损伤周边可见大量表达绿色荧光的细胞,而对照组和假手术组很少.免疫荧光染色实验组NeuN (+)/GFAP(+)、GFP(+)/GFAP(+)细胞明显多于对照组和假手术组(P＜0.05).Western blot显示治疗组大鼠损伤处脊髓BDNF和VEGF表达高于对照组和假手术组(P＜0.05).结论:辛伐他汀可动员BMSCs归巢至脊髓损伤部位并参与损伤修复,其作用可能与其促进BDNF及VEGF高表达有关.
目的:觀察辛伐他汀動員骨髓間充質榦細胞(bone marrow stromal cells,BMSCs)歸巢至脊髓損傷部位對損傷脊髓的脩複作用,併探討其相關機製.方法:成年雌性SD大鼠30隻,經尾靜脈註射移植大鼠轉綠色熒光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因的BMSCs,24h後隨機分為3組:假手術組,僅切除椎闆,不損傷脊髓;對照組,脊髓損傷後經蛛網膜下腔註射載體;實驗組,脊髓損傷後經蛛網膜下腔註射辛伐他汀.每組10隻.對照組和實驗組採用改良Allen法(40g· cm)製作T9～T10節段脊髓損傷模型,從L4水平蛛網膜下腔註射辛伐他汀(5mg/kg)或載體.術前及術後1d、3d、7d、14d、21d、28d時盲法進行BBB評分和斜闆試驗;術後28d處死大鼠,取相應節段脊髓組織行形態計量學觀察脊髓空腔體積大小;應用神經元覈抗原(NeuN)/神經膠質纖維痠性蛋白(GFAP)與GFP免疫熒光雙染法觀察移植GFP-BMSCs的遷移及細胞分化情況;Western blot檢測血管內皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)及腦源性神經營養因子(brain derived neurotrophic factor,BDNF)錶達水平的變化.結果:術後各時間點假手術組動物BBB評分及斜闆試驗角度無明顯變化,實驗組及對照組BBB評分及斜闆試驗角度明顯降低,術後7d、14d、21d、28d時實驗組BBB評分高于對照組(P＜0.05);術後14d、21d、28d時實驗組大鼠的斜闆試驗角度高于對照組(P＜0.05).術後28d時假手術組脊髓內未見空腔,實驗組和對照脊髓損傷部位均可見空洞形成,實驗組空腔體積(0.29±0.08mm3)小于對照組(0.57±0.10mm3)(P＜0.05);熒光顯微鏡下觀察實驗組在脊髓損傷週邊可見大量錶達綠色熒光的細胞,而對照組和假手術組很少.免疫熒光染色實驗組NeuN (+)/GFAP(+)、GFP(+)/GFAP(+)細胞明顯多于對照組和假手術組(P＜0.05).Western blot顯示治療組大鼠損傷處脊髓BDNF和VEGF錶達高于對照組和假手術組(P＜0.05).結論:辛伐他汀可動員BMSCs歸巢至脊髓損傷部位併參與損傷脩複,其作用可能與其促進BDNF及VEGF高錶達有關.
목적:관찰신벌타정동원골수간충질간세포(bone marrow stromal cells,BMSCs)귀소지척수손상부위대손상척수적수복작용,병탐토기상관궤제.방법:성년자성SD대서30지,경미정맥주사이식대서전록색형광단백(green fluorescence protein,GFP)기인적BMSCs,24h후수궤분위3조:가수술조,부절제추판,불손상척수;대조조,척수손상후경주망막하강주사재체;실험조,척수손상후경주망막하강주사신벌타정.매조10지.대조조화실험조채용개량Allen법(40g· cm)제작T9～T10절단척수손상모형,종L4수평주망막하강주사신벌타정(5mg/kg)혹재체.술전급술후1d、3d、7d、14d、21d、28d시맹법진행BBB평분화사판시험;술후28d처사대서,취상응절단척수조직행형태계량학관찰척수공강체적대소;응용신경원핵항원(NeuN)/신경효질섬유산성단백(GFAP)여GFP면역형광쌍염법관찰이식GFP-BMSCs적천이급세포분화정황;Western blot검측혈관내피생장인자(vascular endothelial growth factor,VEGF)급뇌원성신경영양인자(brain derived neurotrophic factor,BDNF)표체수평적변화.결과:술후각시간점가수술조동물BBB평분급사판시험각도무명현변화,실험조급대조조BBB평분급사판시험각도명현강저,술후7d、14d、21d、28d시실험조BBB평분고우대조조(P＜0.05);술후14d、21d、28d시실험조대서적사판시험각도고우대조조(P＜0.05).술후28d시가수술조척수내미견공강,실험조화대조척수손상부위균가견공동형성,실험조공강체적(0.29±0.08mm3)소우대조조(0.57±0.10mm3)(P＜0.05);형광현미경하관찰실험조재척수손상주변가견대량표체록색형광적세포,이대조조화가수술조흔소.면역형광염색실험조NeuN (+)/GFAP(+)、GFP(+)/GFAP(+)세포명현다우대조조화가수술조(P＜0.05).Western blot현시치료조대서손상처척수BDNF화VEGF표체고우대조조화가수술조(P＜0.05).결론:신벌타정가동원BMSCs귀소지척수손상부위병삼여손상수복,기작용가능여기촉진BDNF급VEGF고표체유관.
