生物技术通报
生物技術通報
생물기술통보
BIOTECHNOLOGY BULLETIN
2012年
11期
177-184
,共8页
麦合木提江·米吉提%王旭丽%张桦%曾洪梅%Sehroon Khan%邱德文
麥閤木提江·米吉提%王旭麗%張樺%曾洪梅%Sehroon Khan%邱德文
맥합목제강·미길제%왕욱려%장화%증홍매%Sehroon Khan%구덕문
禾谷镰刀菌%FgβNAC%基因敲除%生长发育%致病性
禾穀鐮刀菌%FgβNAC%基因敲除%生長髮育%緻病性
화곡렴도균%FgβNAC%기인고제%생장발육%치병성
以裂殖酵母NAC蛋白β亚基为对象在禾谷镰刀菌(Fusarium graminearum)基因组数据库中进行搜索,发现了同源蛋白基因FGSG 08675并命名为FgβNAC.通过基因敲除技术对禾谷镰刀菌FgNAC基因进行敲除和回补,分别获得了敲除菌株fgβnac和回补菌株fgβnac::FgβNAC,并分别对野生型菌株、敲除菌株和回补菌株进行了表型和致病性研究.结果表明,与野生型菌株PH-1相比,敲除菌株fgβnac在固体马铃薯培养基(PDA)上生长速率明显减慢,约为野生型菌株的一半,气生菌丝致密短小；同样在液体PD培养液中培养3d的敲除突变株的菌丝干重仅为野生型的56％.另外,敲除突变株的分生孢子产量相比野生型菌株下降了78.5％.进一步采用麦穗离体接种法对其致病性进行了检测,发现FgβNAC基因的缺失引起致病力显著地下降,仅局限于接种部位及邻近的小颖,而无法侵入维管束组织引起穗枯症状.
以裂殖酵母NAC蛋白β亞基為對象在禾穀鐮刀菌(Fusarium graminearum)基因組數據庫中進行搜索,髮現瞭同源蛋白基因FGSG 08675併命名為FgβNAC.通過基因敲除技術對禾穀鐮刀菌FgNAC基因進行敲除和迴補,分彆穫得瞭敲除菌株fgβnac和迴補菌株fgβnac::FgβNAC,併分彆對野生型菌株、敲除菌株和迴補菌株進行瞭錶型和緻病性研究.結果錶明,與野生型菌株PH-1相比,敲除菌株fgβnac在固體馬鈴藷培養基(PDA)上生長速率明顯減慢,約為野生型菌株的一半,氣生菌絲緻密短小；同樣在液體PD培養液中培養3d的敲除突變株的菌絲榦重僅為野生型的56％.另外,敲除突變株的分生孢子產量相比野生型菌株下降瞭78.5％.進一步採用麥穗離體接種法對其緻病性進行瞭檢測,髮現FgβNAC基因的缺失引起緻病力顯著地下降,僅跼限于接種部位及鄰近的小穎,而無法侵入維管束組織引起穗枯癥狀.
이렬식효모NAC단백β아기위대상재화곡렴도균(Fusarium graminearum)기인조수거고중진행수색,발현료동원단백기인FGSG 08675병명명위FgβNAC.통과기인고제기술대화곡렴도균FgNAC기인진행고제화회보,분별획득료고제균주fgβnac화회보균주fgβnac::FgβNAC,병분별대야생형균주、고제균주화회보균주진행료표형화치병성연구.결과표명,여야생형균주PH-1상비,고제균주fgβnac재고체마령서배양기(PDA)상생장속솔명현감만,약위야생형균주적일반,기생균사치밀단소；동양재액체PD배양액중배양3d적고제돌변주적균사간중부위야생형적56％.령외,고제돌변주적분생포자산량상비야생형균주하강료78.5％.진일보채용맥수리체접충법대기치병성진행료검측,발현FgβNAC기인적결실인기치병력현저지하강,부국한우접충부위급린근적소영,이무법침입유관속조직인기수고증상.
