CAJ | 학술논문

采用RT-PCR扩增亚麻种子(Linum usitatissimum Linn)FAD3B基因,构建不同启动子的两种重组真核表达载体pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B和pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,通过qRT-PCR检测转基因细胞中FAD3B基因的表达水平.以不同过表达水平的转基因细胞为试验对象,评价9种候选内参基因ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2和HMBS的稳定性.根据GeNorm、NornFinder和BestKeeper 3种统计学算法得到的稳定性值对基因进行排序.结果显示,内参基因稳定性的综合排序为PPP1R11＞EEF1A2＞1 8S rRNA＞RPS15A＞GAPDH＞HMBS＞UXT＞ACTB＞SF3A1,其中PPP1R11和EEF1A2是最稳定的内参基因.稳定内参的选择可以更加准确地校正基因的表达水平,从而为阐述基因的功能奠定了坚实的基础.
채용RT-PCR확증아마충자(Linum usitatissimum Linn)FAD3B기인,구건불동계동자적량충중조진핵표체재체pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B화pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,통과qRT-PCR검측전기인세포중FAD3B기인적표체수평.이불동과표체수평적전기인세포위시험대상,평개9충후선내삼기인ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2화HMBS적은정성.근거GeNorm、NornFinder화BestKeeper 3충통계학산법득도적은정성치대기인진행배서.결과현시,내삼기인은정성적종합배서위PPP1R11＞EEF1A2＞1 8S rRNA＞RPS15A＞GAPDH＞HMBS＞UXT＞ACTB＞SF3A1,기중PPP1R11화EEF1A2시최은정적내삼기인.은정내삼적선택가이경가준학지교정기인적표체수평,종이위천술기인적공능전정료견실적기출.