上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
11期
1466-1471
,共6页
PML/RARα%GADD45A%p53%急性早幼粒细胞白血病
PML/RARα%GADD45A%p53%急性早幼粒細胞白血病
PML/RARα%GADD45A%p53%급성조유립세포백혈병
目的 研究异常转录因子PML/RARα对GADD45A的转录调控机制,为进一步阐释PML/RARα在急性早幼粒细胞白血病(APL)发病中的作用机制提供线索.方法 运用ChIP-PCR技术研究PML/RARα与GADD45A的结合情况；采用Real-TimePCR技术检测PR9细胞中GADD45A mRNA的表达水平,并分析其与PML/RARα融合蛋白表达的相关性；利用真核细胞表达载体在H1299细胞中过表达PML/RARα和p53蛋白,研究PML/RARα与p53对GADD45A的共调控关系.结果 PML/RARαChIP-qPCR结果显示:PML/RARα特异性抗体能够富集GADD45A基因功能区第3个内含子区的DNA片段,而非特异性IgG不能够富集；在PR9细胞中发现GADD45A mRNA表达水平与PML/RARα蛋白的表达呈负相关,说明在PR9细胞中PML/RARα融合蛋白能够抑制GADD45A的表达；在H1299细胞中单独转染野生型p53表达质粒后,GADD45A在mRNA水平显著上调,而共转染PML/RARα和野生型p53表达质粒后,PML/RARα能够显著抑制p53对GA DD45A在mRNA水平的上调作用(P＜0.01).结论 PML/RARα能够结合在GADD45A第3个内含子区域并抑制其转录表达.GADD45A同时也是p53的靶基因,PML/RARα与p53对GADD45A有共调控关系.PML/RARα能够抑制p53对GADD45A的转录激活效应.
目的 研究異常轉錄因子PML/RARα對GADD45A的轉錄調控機製,為進一步闡釋PML/RARα在急性早幼粒細胞白血病(APL)髮病中的作用機製提供線索.方法 運用ChIP-PCR技術研究PML/RARα與GADD45A的結閤情況；採用Real-TimePCR技術檢測PR9細胞中GADD45A mRNA的錶達水平,併分析其與PML/RARα融閤蛋白錶達的相關性；利用真覈細胞錶達載體在H1299細胞中過錶達PML/RARα和p53蛋白,研究PML/RARα與p53對GADD45A的共調控關繫.結果 PML/RARαChIP-qPCR結果顯示:PML/RARα特異性抗體能夠富集GADD45A基因功能區第3箇內含子區的DNA片段,而非特異性IgG不能夠富集；在PR9細胞中髮現GADD45A mRNA錶達水平與PML/RARα蛋白的錶達呈負相關,說明在PR9細胞中PML/RARα融閤蛋白能夠抑製GADD45A的錶達；在H1299細胞中單獨轉染野生型p53錶達質粒後,GADD45A在mRNA水平顯著上調,而共轉染PML/RARα和野生型p53錶達質粒後,PML/RARα能夠顯著抑製p53對GA DD45A在mRNA水平的上調作用(P＜0.01).結論 PML/RARα能夠結閤在GADD45A第3箇內含子區域併抑製其轉錄錶達.GADD45A同時也是p53的靶基因,PML/RARα與p53對GADD45A有共調控關繫.PML/RARα能夠抑製p53對GADD45A的轉錄激活效應.
목적 연구이상전록인자PML/RARα대GADD45A적전록조공궤제,위진일보천석PML/RARα재급성조유립세포백혈병(APL)발병중적작용궤제제공선색.방법 운용ChIP-PCR기술연구PML/RARα여GADD45A적결합정황；채용Real-TimePCR기술검측PR9세포중GADD45A mRNA적표체수평,병분석기여PML/RARα융합단백표체적상관성；이용진핵세포표체재체재H1299세포중과표체PML/RARα화p53단백,연구PML/RARα여p53대GADD45A적공조공관계.결과 PML/RARαChIP-qPCR결과현시:PML/RARα특이성항체능구부집GADD45A기인공능구제3개내함자구적DNA편단,이비특이성IgG불능구부집；재PR9세포중발현GADD45A mRNA표체수평여PML/RARα단백적표체정부상관,설명재PR9세포중PML/RARα융합단백능구억제GADD45A적표체；재H1299세포중단독전염야생형p53표체질립후,GADD45A재mRNA수평현저상조,이공전염PML/RARα화야생형p53표체질립후,PML/RARα능구현저억제p53대GA DD45A재mRNA수평적상조작용(P＜0.01).결론 PML/RARα능구결합재GADD45A제3개내함자구역병억제기전록표체.GADD45A동시야시p53적파기인,PML/RARα여p53대GADD45A유공조공관계.PML/RARα능구억제p53대GADD45A적전록격활효응.
