上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
11期
1444-1447
,共4页
汤俊明%陈翠翠%王学才%赵俊伟%张舒林
湯俊明%陳翠翠%王學纔%趙俊偉%張舒林
탕준명%진취취%왕학재%조준위%장서림
结核分枝杆菌%Rv3117%克隆%Western blotting
結覈分枝桿菌%Rv3117%剋隆%Western blotting
결핵분지간균%Rv3117%극륭%Western blotting
目的 克隆表达结核分枝杆菌Rv3117蛋白,并进行诱导小鼠免疫应答的初步研究.方法 通过聚合酶链反应(PCR)扩增结核分枝杆菌Rv3117基因,克隆入pET32a载体,构建重组质粒pET32a-Rv3117,转化入大肠埃希菌BL21(E.coli) plysS(DE3),异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,镍柱亲和纯化,通过SDS-PAGE鉴定其表达情况；以目的蛋白免疫C57BL/6小鼠血清并行Western blotting分析.结果 成功构建原核表达载体pET32a-Rv3117,获得纯化的目的蛋白,其在E.coli BL21 plysS(DE3)中主要以可溶性形式表达,相对分子质量(48 100)与预期相符.Western blotting分析结果显示在目标位置有阳性条带.结论 成功克隆结核分枝杆菌重组蛋白Rv3117,其能够诱导C57BL/6小鼠的免疫应答.
目的 剋隆錶達結覈分枝桿菌Rv3117蛋白,併進行誘導小鼠免疫應答的初步研究.方法 通過聚閤酶鏈反應(PCR)擴增結覈分枝桿菌Rv3117基因,剋隆入pET32a載體,構建重組質粒pET32a-Rv3117,轉化入大腸埃希菌BL21(E.coli) plysS(DE3),異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導錶達,鎳柱親和純化,通過SDS-PAGE鑒定其錶達情況；以目的蛋白免疫C57BL/6小鼠血清併行Western blotting分析.結果 成功構建原覈錶達載體pET32a-Rv3117,穫得純化的目的蛋白,其在E.coli BL21 plysS(DE3)中主要以可溶性形式錶達,相對分子質量(48 100)與預期相符.Western blotting分析結果顯示在目標位置有暘性條帶.結論 成功剋隆結覈分枝桿菌重組蛋白Rv3117,其能夠誘導C57BL/6小鼠的免疫應答.
목적 극륭표체결핵분지간균Rv3117단백,병진행유도소서면역응답적초보연구.방법 통과취합매련반응(PCR)확증결핵분지간균Rv3117기인,극륭입pET32a재체,구건중조질립pET32a-Rv3117,전화입대장애희균BL21(E.coli) plysS(DE3),이병기류대-β-D-반유당감(IPTG)유도표체,얼주친화순화,통과SDS-PAGE감정기표체정황；이목적단백면역C57BL/6소서혈청병행Western blotting분석.결과 성공구건원핵표체재체pET32a-Rv3117,획득순화적목적단백,기재E.coli BL21 plysS(DE3)중주요이가용성형식표체,상대분자질량(48 100)여예기상부.Western blotting분석결과현시재목표위치유양성조대.결론 성공극륭결핵분지간균중조단백Rv3117,기능구유도C57BL/6소서적면역응답.
