上海交通大学学报（医学版）
上海交通大學學報（醫學版）
상해교통대학학보（의학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCE)
2012年
11期
1415-1420
,共6页
周爱萍%徐志弘%孙青%姚玉峰%吴兴福
週愛萍%徐誌弘%孫青%姚玉峰%吳興福
주애평%서지홍%손청%요옥봉%오흥복
结核分枝杆菌%MTB散在分布重复单位位点%pMC210%启动子
結覈分枝桿菌%MTB散在分佈重複單位位點%pMC210%啟動子
결핵분지간균%MTB산재분포중복단위위점%pMC210%계동자
目的 分析结核分枝杆菌(MTB)北京型菌株及非北京型菌株5个有明显差异的MTB散在分布重复单位(MIRU)位点,研究其多态性与下游基因表达的关系.方法 利用生物信息学方法预测5个MIRU位点(ETR-C、Mtub-30、Mtub-39、MIRU-27、MIRU-40)下游相邻基因启动子区域.通过PCR方法扩增该区域并与分枝杆菌启动子探针载体pMC210连接,重组质粒测序正确后,用电穿孔方法转化耻垢分枝杆菌mc2155.采用Real-Time PCR技术检测报告基因lacZ的转录水平,验证MIRU位点多态性对其下游基因表达的影响.结果 Mtub-39位点核心区域内含有其下游基因的启动子.成功构建了分别带有1、3、5个拷贝重复序列的Mtub-39位点的重组质粒.Real-Time PCR结果显示,有多态性的Mtub-39位点(pMC210-Mtub-39-N158、pMC210-Mtub-39-N139及pMC210-Mtub-39-N146)对报告基因lacZ的转录调控差异有统计学意义(P=0.006 5).结论 Mtub-39位点的多态性能明显影响下游基因启动子的活性进而调节其表达.
目的 分析結覈分枝桿菌(MTB)北京型菌株及非北京型菌株5箇有明顯差異的MTB散在分佈重複單位(MIRU)位點,研究其多態性與下遊基因錶達的關繫.方法 利用生物信息學方法預測5箇MIRU位點(ETR-C、Mtub-30、Mtub-39、MIRU-27、MIRU-40)下遊相鄰基因啟動子區域.通過PCR方法擴增該區域併與分枝桿菌啟動子探針載體pMC210連接,重組質粒測序正確後,用電穿孔方法轉化恥垢分枝桿菌mc2155.採用Real-Time PCR技術檢測報告基因lacZ的轉錄水平,驗證MIRU位點多態性對其下遊基因錶達的影響.結果 Mtub-39位點覈心區域內含有其下遊基因的啟動子.成功構建瞭分彆帶有1、3、5箇拷貝重複序列的Mtub-39位點的重組質粒.Real-Time PCR結果顯示,有多態性的Mtub-39位點(pMC210-Mtub-39-N158、pMC210-Mtub-39-N139及pMC210-Mtub-39-N146)對報告基因lacZ的轉錄調控差異有統計學意義(P=0.006 5).結論 Mtub-39位點的多態性能明顯影響下遊基因啟動子的活性進而調節其錶達.
목적 분석결핵분지간균(MTB)북경형균주급비북경형균주5개유명현차이적MTB산재분포중복단위(MIRU)위점,연구기다태성여하유기인표체적관계.방법 이용생물신식학방법예측5개MIRU위점(ETR-C、Mtub-30、Mtub-39、MIRU-27、MIRU-40)하유상린기인계동자구역.통과PCR방법확증해구역병여분지간균계동자탐침재체pMC210련접,중조질립측서정학후,용전천공방법전화치구분지간균mc2155.채용Real-Time PCR기술검측보고기인lacZ적전록수평,험증MIRU위점다태성대기하유기인표체적영향.결과 Mtub-39위점핵심구역내함유기하유기인적계동자.성공구건료분별대유1、3、5개고패중복서렬적Mtub-39위점적중조질립.Real-Time PCR결과현시,유다태성적Mtub-39위점(pMC210-Mtub-39-N158、pMC210-Mtub-39-N139급pMC210-Mtub-39-N146)대보고기인lacZ적전록조공차이유통계학의의(P=0.006 5).결론 Mtub-39위점적다태성능명현영향하유기인계동자적활성진이조절기표체.
