西北植物学报
西北植物學報
서북식물학보
ACTA BOTANICA BOREALI-OCCIDENTALIA SINICA
2012年
12期
2412-2418
,共7页
金刚%牛英%唐向民%周琼%周瑞阳
金剛%牛英%唐嚮民%週瓊%週瑞暘
금강%우영%당향민%주경%주서양
红麻%细胞质雄性不育%线粒体%SRAP%SNP
紅痳%細胞質雄性不育%線粒體%SRAP%SNP
홍마%세포질웅성불육%선립체%SRAP%SNP
利用同源克隆的方法,克隆了红麻野败型CMS胞质SRAP标记位点Me14上游的侧翼序列,并采用RT-PCR方法研究该位点的表达.结果表明:(1)红麻不育系P3A和保持系P3B的mtDNA在Me14结合位点处存在1个G/A SNP位点；HpaⅡ内切酶可特异性酶切以保持系P3B扩增获得的E1纯化片段,而不育系P3A的E1纯化片段不能被酶切.(2)对红麻的9对不育系/保持系、5个恢复系和F1杂交种在该SNP位点的分析发现,以保持系和恢复系总DNA为模板扩增获得的E1纯化片段均可为HpaⅡ内切酶特异性酶切,而不育系和F1杂交种的E1纯化片段不能被酶切.(3) RT-PCR结果表明,E1片段对应基因在不育系P3A和保持系P3B中的时空表达模式无差异,在GenBank中也没有与E1相匹配的蛋白序列.研究表明,该研究发掘的红麻CMS胞质SNP标记位点处,不育系的mtDNA存在点突变,该标签并非具有嵌合阅读框的不育基因.
利用同源剋隆的方法,剋隆瞭紅痳野敗型CMS胞質SRAP標記位點Me14上遊的側翼序列,併採用RT-PCR方法研究該位點的錶達.結果錶明:(1)紅痳不育繫P3A和保持繫P3B的mtDNA在Me14結閤位點處存在1箇G/A SNP位點；HpaⅡ內切酶可特異性酶切以保持繫P3B擴增穫得的E1純化片段,而不育繫P3A的E1純化片段不能被酶切.(2)對紅痳的9對不育繫/保持繫、5箇恢複繫和F1雜交種在該SNP位點的分析髮現,以保持繫和恢複繫總DNA為模闆擴增穫得的E1純化片段均可為HpaⅡ內切酶特異性酶切,而不育繫和F1雜交種的E1純化片段不能被酶切.(3) RT-PCR結果錶明,E1片段對應基因在不育繫P3A和保持繫P3B中的時空錶達模式無差異,在GenBank中也沒有與E1相匹配的蛋白序列.研究錶明,該研究髮掘的紅痳CMS胞質SNP標記位點處,不育繫的mtDNA存在點突變,該標籤併非具有嵌閤閱讀框的不育基因.
이용동원극륭적방법,극륭료홍마야패형CMS포질SRAP표기위점Me14상유적측익서렬,병채용RT-PCR방법연구해위점적표체.결과표명:(1)홍마불육계P3A화보지계P3B적mtDNA재Me14결합위점처존재1개G/A SNP위점；HpaⅡ내절매가특이성매절이보지계P3B확증획득적E1순화편단,이불육계P3A적E1순화편단불능피매절.(2)대홍마적9대불육계/보지계、5개회복계화F1잡교충재해SNP위점적분석발현,이보지계화회복계총DNA위모판확증획득적E1순화편단균가위HpaⅡ내절매특이성매절,이불육계화F1잡교충적E1순화편단불능피매절.(3) RT-PCR결과표명,E1편단대응기인재불육계P3A화보지계P3B중적시공표체모식무차이,재GenBank중야몰유여E1상필배적단백서렬.연구표명,해연구발굴적홍마CMS포질SNP표기위점처,불육계적mtDNA존재점돌변,해표첨병비구유감합열독광적불육기인.
