西安文理学院学报（自然科学版）
西安文理學院學報（自然科學版）
서안문이학원학보（자연과학판）
JOURNAL OF XI'AN UNIVERSITY OF ARTS AND SCIENCE (NATURAL SCIENCE EDITION)
2013年
1期
39-43
,共5页
丁群英%赵银萍%廖新福%郭霭光
丁群英%趙銀萍%廖新福%郭靄光
정군영%조은평%료신복%곽애광
甜瓜%SSR%PCR扩增%正交设计
甜瓜%SSR%PCR擴增%正交設計
첨과%SSR%PCR확증%정교설계
以新疆哈密瓜为试验材料,利用正交试验设计研究了4个主要因子(Mg2+、DNA聚合酶、SSR引物和dNTP)对SSR扩增结果的影响,并对该哈密瓜SSR反应体系进行了优化,同时尝试用降落(Touchdown,TD)PCR方法扩增目的片段.最终筛选出如下最佳反应体系:总反应体积为25 μL,其中dNTP 200 μmol/L,SSR引物0.75μmol/L,Taq DNA聚合酶1.0 U,Mg2+ 1.5 mmol/L;降落PCR省却了常规PCR中摸索最适退火温度的过程,对一些Tm值相近的PCR反应可应用一套温度程序扩增,是一种行之有效的方法.
以新疆哈密瓜為試驗材料,利用正交試驗設計研究瞭4箇主要因子(Mg2+、DNA聚閤酶、SSR引物和dNTP)對SSR擴增結果的影響,併對該哈密瓜SSR反應體繫進行瞭優化,同時嘗試用降落(Touchdown,TD)PCR方法擴增目的片段.最終篩選齣如下最佳反應體繫:總反應體積為25 μL,其中dNTP 200 μmol/L,SSR引物0.75μmol/L,Taq DNA聚閤酶1.0 U,Mg2+ 1.5 mmol/L;降落PCR省卻瞭常規PCR中摸索最適退火溫度的過程,對一些Tm值相近的PCR反應可應用一套溫度程序擴增,是一種行之有效的方法.
이신강합밀과위시험재료,이용정교시험설계연구료4개주요인자(Mg2+、DNA취합매、SSR인물화dNTP)대SSR확증결과적영향,병대해합밀과SSR반응체계진행료우화,동시상시용강락(Touchdown,TD)PCR방법확증목적편단.최종사선출여하최가반응체계:총반응체적위25 μL,기중dNTP 200 μmol/L,SSR인물0.75μmol/L,Taq DNA취합매1.0 U,Mg2+ 1.5 mmol/L;강락PCR성각료상규PCR중모색최괄퇴화온도적과정,대일사Tm치상근적PCR반응가응용일투온도정서확증,시일충행지유효적방법.
