CAJ | 학술논문

目的:通过体外培养骨骼肌细胞,测定凋亡效应相关蛋白酶cys蛋白酶-3(caspase-3)及其抑制剂对骨骼肌细胞蛋白降解率的影响,探讨骨骼肌细胞凋亡的可能的调控因子.方法:0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg的肌动球蛋白复合体的反应体系中加入1单位的重组Caspase-3,通过Western Blot电泳.体外培养骨骼肌细胞,并刺激其形成肌管,将培养的骨骼肌分为3组,分别为对照组、实验组A加入1单位Caspase-3,实验组B加入50 nM Caspase-3的抑制剂Ac-DEVD-CHO,体系中均加入2mM ATP(三磷酸腺苷).用氨基酸全谱分析仪测定酪氨酸和3-甲基组氨酸的浓度.结果:0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg的肌动球蛋白复合体和1单位的重组Caspase-3,均可见到14kDa-actin条带,而肌动球蛋白复合体在0.5μg、1μg剂量时条带消失,在2μg、4μg、8μg时条带逐渐增大.与对照组相比,给予caspase-3后骨骼肌细胞总蛋白降解率增加36.9％,肌纤维蛋白降解率增加66.4％,给予DEVD后总蛋白降解率下降17.7％,肌纤维蛋白降解率下降27.7％.结论:caspase 3在体外可以降解肌动球蛋白复合体,而且还能改变骨骼肌蛋白降解率.caspase-3在骨骼肌蛋白降解中发挥了重要作用,参与了骨骼肌细胞的凋亡.
목적:통과체외배양골격기세포,측정조망효응상관단백매cys단백매-3(caspase-3)급기억제제대골격기세포단백강해솔적영향,탐토골격기세포조망적가능적조공인자.방법:0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg적기동구단백복합체적반응체계중가입1단위적중조Caspase-3,통과Western Blot전영.체외배양골격기세포,병자격기형성기관,장배양적골격기분위3조,분별위대조조、실험조A가입1단위Caspase-3,실험조B가입50 nM Caspase-3적억제제Ac-DEVD-CHO,체계중균가입2mM ATP(삼린산선감).용안기산전보분석의측정락안산화3-갑기조안산적농도.결과:0.5μg、1μg、2μg、4μg、8μg적기동구단백복합체화1단위적중조Caspase-3,균가견도14kDa-actin조대,이기동구단백복합체재0.5μg、1μg제량시조대소실,재2μg、4μg、8μg시조대축점증대.여대조조상비,급여caspase-3후골격기세포총단백강해솔증가36.9％,기섬유단백강해솔증가66.4％,급여DEVD후총단백강해솔하강17.7％,기섬유단백강해솔하강27.7％.결론:caspase 3재체외가이강해기동구단백복합체,이차환능개변골격기단백강해솔.caspase-3재골격기단백강해중발휘료중요작용,삼여료골격기세포적조망.