山西医科大学学报
山西醫科大學學報
산서의과대학학보
JOURNAL OF SHANXI MEDICAL UNIVERSITY
2013年
3期
192-195,248
,共5页
李松林%李霏%刘新莉%尹元琴
李鬆林%李霏%劉新莉%尹元琴
리송림%리비%류신리%윤원금
NK4%乳腺癌%慢病毒载体
NK4%乳腺癌%慢病毒載體
NK4%유선암%만병독재체
目的 通过在人乳腺癌细胞MDA-MB-231中转染携带有NK4基因的慢病毒载体,研究NK4对乳腺癌细胞的生物学特性影响及其作用机制. 方法 将NK4重组慢病毒载体pLenti6.3-NK4-IRES-EGFP转染人乳腺癌细胞MDA-MB31.采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫印迹法(Western blot)检测转染细胞中NK4的基因和蛋白表达,检测在肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)存在的条件下磷酸化c-met受体(p-met)的表达.采用MTT、Transwell小室检测转染NK4基因对乳腺癌细胞的生长、侵袭的影响. 结果 转染NK4基因的乳腺癌细胞MDA-MB-231能够表达并分泌NK4,RT-PCR扩增出预期的453 bp片段,Western blot显示有50 kD的蛋白并且转染组与空载体组和对照组相比p-met的表达明显减弱.MTT结果显示转染NK4组细胞生长抑制率达(67±2.04)％,较其他两组抑制率高(P＜0.01),Transwell结果显示转染NK4基因能够显著抑制由HGF诱导的乳腺癌细胞的侵袭(P＜0.01). 结论 NK4通过竞争性抑制HGF诱导的乳腺癌细胞中c-met受体的磷酸化从而抑制了乳腺癌的生长、侵袭.
目的 通過在人乳腺癌細胞MDA-MB-231中轉染攜帶有NK4基因的慢病毒載體,研究NK4對乳腺癌細胞的生物學特性影響及其作用機製. 方法 將NK4重組慢病毒載體pLenti6.3-NK4-IRES-EGFP轉染人乳腺癌細胞MDA-MB31.採用逆轉錄聚閤酶鏈反應(RT-PCR)及免疫印跡法(Western blot)檢測轉染細胞中NK4的基因和蛋白錶達,檢測在肝細胞生長因子(hepatocyte growth factor,HGF)存在的條件下燐痠化c-met受體(p-met)的錶達.採用MTT、Transwell小室檢測轉染NK4基因對乳腺癌細胞的生長、侵襲的影響. 結果 轉染NK4基因的乳腺癌細胞MDA-MB-231能夠錶達併分泌NK4,RT-PCR擴增齣預期的453 bp片段,Western blot顯示有50 kD的蛋白併且轉染組與空載體組和對照組相比p-met的錶達明顯減弱.MTT結果顯示轉染NK4組細胞生長抑製率達(67±2.04)％,較其他兩組抑製率高(P＜0.01),Transwell結果顯示轉染NK4基因能夠顯著抑製由HGF誘導的乳腺癌細胞的侵襲(P＜0.01). 結論 NK4通過競爭性抑製HGF誘導的乳腺癌細胞中c-met受體的燐痠化從而抑製瞭乳腺癌的生長、侵襲.
목적 통과재인유선암세포MDA-MB-231중전염휴대유NK4기인적만병독재체,연구NK4대유선암세포적생물학특성영향급기작용궤제. 방법 장NK4중조만병독재체pLenti6.3-NK4-IRES-EGFP전염인유선암세포MDA-MB31.채용역전록취합매련반응(RT-PCR)급면역인적법(Western blot)검측전염세포중NK4적기인화단백표체,검측재간세포생장인자(hepatocyte growth factor,HGF)존재적조건하린산화c-met수체(p-met)적표체.채용MTT、Transwell소실검측전염NK4기인대유선암세포적생장、침습적영향. 결과 전염NK4기인적유선암세포MDA-MB-231능구표체병분비NK4,RT-PCR확증출예기적453 bp편단,Western blot현시유50 kD적단백병차전염조여공재체조화대조조상비p-met적표체명현감약.MTT결과현시전염NK4조세포생장억제솔체(67±2.04)％,교기타량조억제솔고(P＜0.01),Transwell결과현시전염NK4기인능구현저억제유HGF유도적유선암세포적침습(P＜0.01). 결론 NK4통과경쟁성억제HGF유도적유선암세포중c-met수체적린산화종이억제료유선암적생장、침습.
