CAJ | 학술논문

通过对GenBank公布的鸭甲型肝炎病毒全序列比对,在3型鸭甲肝炎病毒(DHVA-3)5'非编码区的保守区,设计了一对检测引物和一条特异性TaqMan探针,以构建的阳性重组质粒经体外转录合成的RNA作为标准品绘制标准曲线,建立了一种快速检测DHAV-3的实时荧光定量RT-PCR方法.该方法能特异性地检测出DHAV-3,而与血清1型鸭肝炎病毒(DHAV-1)、鸭瘟病毒、新城疫病毒、禽流感病毒(H9)、呼肠孤病毒、传染性支气管炎病毒无交叉反应.在1.8×103～1.8×108 copies/μL的检测范围内标准曲线线性关系较好,R2为0.992.敏感性试验表明,最低检测限为36拷贝数RNA.用该方法和胚半数致死量法对尿囊液中病毒含量进行检测,表明二种方法检测结果呈正相关.本研究所建立的检测方法特异性好,灵敏度高,且操作方便,可为该病毒的快速诊断和流行病学调查提供技术手段.
통과대GenBank공포적압갑형간염병독전서렬비대,재3형압갑간염병독(DHVA-3)5'비편마구적보수구,설계료일대검측인물화일조특이성TaqMan탐침,이구건적양성중조질립경체외전록합성적RNA작위표준품회제표준곡선,건립료일충쾌속검측DHAV-3적실시형광정량RT-PCR방법.해방법능특이성지검측출DHAV-3,이여혈청1형압간염병독(DHAV-1)、압온병독、신성역병독、금류감병독(H9)、호장고병독、전염성지기관염병독무교차반응.재1.8×103～1.8×108 copies/μL적검측범위내표준곡선선성관계교호,R2위0.992.민감성시험표명,최저검측한위36고패수RNA.용해방법화배반수치사량법대뇨낭액중병독함량진행검측,표명이충방법검측결과정정상관.본연구소건립적검측방법특이성호,령민도고,차조작방편,가위해병독적쾌속진단화류행병학조사제공기술수단.