中国药理学通报
中國藥理學通報
중국약이학통보
CHINESE PHARMACOLOGICAL BULLETIN
2013年
6期
796-801
,共6页
林珍%周德喜%解丹%孔令娜%房城伯%詹磊%黄成%李俊
林珍%週德喜%解丹%孔令娜%房城伯%詹磊%黃成%李俊
림진%주덕희%해단%공령나%방성백%첨뢰%황성%리준
瞬时受体电位通道7%siRNA%阿尔采末病%炎症因子%Aβ25-35%SH-SY5Y%NF-κB
瞬時受體電位通道7%siRNA%阿爾採末病%炎癥因子%Aβ25-35%SH-SY5Y%NF-κB
순시수체전위통도7%siRNA%아이채말병%염증인자%Aβ25-35%SH-SY5Y%NF-κB
目的 利用小干扰RNA(siRNA)抑制TRPM7基因的表达,研究TRPM7对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞分泌炎症因子的影响.方法 通过Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞构建阿尔采末病体外模型,MTT法测定Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞最佳作用浓度与时间点,将人工合成抑制TRPM7基因的siRNA片段,通过脂质体LipofectamineTM 2000转染到SH-SY5Y细胞内;RT-PCR检测TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒的测定细胞上清乳酸脱氢酶(LDH)的含量;ELISA测定细胞上清中TNF-α、IL-6的含量.结果 转染siRNA后SH-SY5Y细胞的TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA表达较模型组明显下降,细胞上清中TNF-α、IL-6、LDH的含量表达较模型组明显下降.结论 应用siRNA干扰靶向抑制TRPM7基因,可以下调TNF-α、IL-6等炎症因子的释放,这一过程可能是通过抑制NF-κB信号转导通路的激活,从而减少炎症因子的释放,进而减轻Aβ对SH-SY5Y细胞的毒性作用.
目的 利用小榦擾RNA(siRNA)抑製TRPM7基因的錶達,研究TRPM7對Aβ25-35誘導SH-SY5Y細胞分泌炎癥因子的影響.方法 通過Aβ25-35誘導SH-SY5Y細胞構建阿爾採末病體外模型,MTT法測定Aβ25-35誘導SH-SY5Y細胞最佳作用濃度與時間點,將人工閤成抑製TRPM7基因的siRNA片段,通過脂質體LipofectamineTM 2000轉染到SH-SY5Y細胞內;RT-PCR檢測TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA錶達,乳痠脫氫酶(LDH)試劑盒的測定細胞上清乳痠脫氫酶(LDH)的含量;ELISA測定細胞上清中TNF-α、IL-6的含量.結果 轉染siRNA後SH-SY5Y細胞的TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA錶達較模型組明顯下降,細胞上清中TNF-α、IL-6、LDH的含量錶達較模型組明顯下降.結論 應用siRNA榦擾靶嚮抑製TRPM7基因,可以下調TNF-α、IL-6等炎癥因子的釋放,這一過程可能是通過抑製NF-κB信號轉導通路的激活,從而減少炎癥因子的釋放,進而減輕Aβ對SH-SY5Y細胞的毒性作用.
목적 이용소간우RNA(siRNA)억제TRPM7기인적표체,연구TRPM7대Aβ25-35유도SH-SY5Y세포분비염증인자적영향.방법 통과Aβ25-35유도SH-SY5Y세포구건아이채말병체외모형,MTT법측정Aβ25-35유도SH-SY5Y세포최가작용농도여시간점,장인공합성억제TRPM7기인적siRNA편단,통과지질체LipofectamineTM 2000전염도SH-SY5Y세포내;RT-PCR검측TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA표체,유산탈경매(LDH)시제합적측정세포상청유산탈경매(LDH)적함량;ELISA측정세포상청중TNF-α、IL-6적함량.결과 전염siRNA후SH-SY5Y세포적TRPM7、NF-κB、TNF-α、IL-6 mRNA표체교모형조명현하강,세포상청중TNF-α、IL-6、LDH적함량표체교모형조명현하강.결론 응용siRNA간우파향억제TRPM7기인,가이하조TNF-α、IL-6등염증인자적석방,저일과정가능시통과억제NF-κB신호전도통로적격활,종이감소염증인자적석방,진이감경Aβ대SH-SY5Y세포적독성작용.
