上海师范大学学报（自然科学版）
上海師範大學學報（自然科學版）
상해사범대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI TEACHERS UNIVERSITY(NATURAL SCIENCES)
2013年
2期
197-205
,共9页
程芳%沈平%张大兵%李建粤%杨立桃
程芳%瀋平%張大兵%李建粵%楊立桃
정방%침평%장대병%리건월%양립도
转基因生物%大豆%玉米%加工食品%荧光定量PCR
轉基因生物%大豆%玉米%加工食品%熒光定量PCR
전기인생물%대두%옥미%가공식품%형광정량PCR
genetically modified organisms%soybean%maize%processed foods%real-time PCR
在很多国家,转基因生物(GMOs)及其衍生产品必须标有精确的转基因含量.最近研究中,实时定量PCR技术广泛应用于转基因成分的检测.然而,转基因生物的实时定量PCR方法的精确度仍然是一个难以解决的问题,尤其是对于高温处理过的样品.为了更好地准确定量高温处理样品中转基因的含量,对普通的实时定量PCR体系做了一些改进,包括重新设计内源基因和外源基因的引物,使得扩增较短并且大小接近的目标DNA片段,同时引物的GC含量和溶解温度也都相近.此外,采用热处理加工模型(HTPM)的方法,制备了含有转基因大豆GTS 40-3-2的样品,并验证了改进后的实时定量PCR系统.实验结果表明:使用改进后的实时定量PCR体系测定热处理过的样品,发现其中的转基因含量的定量偏差明显降低.同时使用改进的双重实时定量PCR进一步验证转基因大豆的加工食品,结果也显示,转基因含量的定量结果更准确.这些结果表明:改进的双重实时定量PCR将适用于热加工产品的定量检测.
在很多國傢,轉基因生物(GMOs)及其衍生產品必鬚標有精確的轉基因含量.最近研究中,實時定量PCR技術廣汎應用于轉基因成分的檢測.然而,轉基因生物的實時定量PCR方法的精確度仍然是一箇難以解決的問題,尤其是對于高溫處理過的樣品.為瞭更好地準確定量高溫處理樣品中轉基因的含量,對普通的實時定量PCR體繫做瞭一些改進,包括重新設計內源基因和外源基因的引物,使得擴增較短併且大小接近的目標DNA片段,同時引物的GC含量和溶解溫度也都相近.此外,採用熱處理加工模型(HTPM)的方法,製備瞭含有轉基因大豆GTS 40-3-2的樣品,併驗證瞭改進後的實時定量PCR繫統.實驗結果錶明:使用改進後的實時定量PCR體繫測定熱處理過的樣品,髮現其中的轉基因含量的定量偏差明顯降低.同時使用改進的雙重實時定量PCR進一步驗證轉基因大豆的加工食品,結果也顯示,轉基因含量的定量結果更準確.這些結果錶明:改進的雙重實時定量PCR將適用于熱加工產品的定量檢測.
재흔다국가,전기인생물(GMOs)급기연생산품필수표유정학적전기인함량.최근연구중,실시정량PCR기술엄범응용우전기인성분적검측.연이,전기인생물적실시정량PCR방법적정학도잉연시일개난이해결적문제,우기시대우고온처리과적양품.위료경호지준학정량고온처리양품중전기인적함량,대보통적실시정량PCR체계주료일사개진,포괄중신설계내원기인화외원기인적인물,사득확증교단병차대소접근적목표DNA편단,동시인물적GC함량화용해온도야도상근.차외,채용열처리가공모형(HTPM)적방법,제비료함유전기인대두GTS 40-3-2적양품,병험증료개진후적실시정량PCR계통.실험결과표명:사용개진후적실시정량PCR체계측정열처리과적양품,발현기중적전기인함량적정량편차명현강저.동시사용개진적쌍중실시정량PCR진일보험증전기인대두적가공식품,결과야현시,전기인함량적정량결과경준학.저사결과표명:개진적쌍중실시정량PCR장괄용우열가공산품적정량검측.
