厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2013年
3期
405-410
,共6页
叶曦%伍小春%李国伟%罗炜%王团老
葉晞%伍小春%李國偉%囉煒%王糰老
협희%오소춘%리국위%라위%왕단로
巴尔通体%HBPC%抗原
巴爾通體%HBPC%抗原
파이통체%HBPC%항원
为了寻找可用于巴尔通体(Bartonella)检测的特异性抗原,利用PCR方法从巴尔通体厦门分离株(B.tribocorum_XM)的基因组DNA中扩增出血红素结合蛋白 C(HBPC)蛋白基岗,并将该基因的编码区克隆到pGEX-4T-1原核表达载体中,构建带GST标签的融合蛋白重组表达载体,并转化大肠杆菌(Escherichia coli DH5α),诱导表达GST-HBPC,通过亲和层析技术纯化GST-HBPC.最后运用蛋门质斑点印迹试验(Western blot)和间接ELISA法检验GST-HBPC是否具有抗原性.结果表明,所构建的表达载体可在大肠杆菌中大量表达GST-HBPC,Western blot和间接ELISA显示GST-HBPC能够特异性地与感染动物血液样本发生免疫反应.因此,体外重组的巴尔通体抗原蛋白HBPC可作为潜在的抗原用于巴尔通体血清学免疫检测.
為瞭尋找可用于巴爾通體(Bartonella)檢測的特異性抗原,利用PCR方法從巴爾通體廈門分離株(B.tribocorum_XM)的基因組DNA中擴增齣血紅素結閤蛋白 C(HBPC)蛋白基崗,併將該基因的編碼區剋隆到pGEX-4T-1原覈錶達載體中,構建帶GST標籤的融閤蛋白重組錶達載體,併轉化大腸桿菌(Escherichia coli DH5α),誘導錶達GST-HBPC,通過親和層析技術純化GST-HBPC.最後運用蛋門質斑點印跡試驗(Western blot)和間接ELISA法檢驗GST-HBPC是否具有抗原性.結果錶明,所構建的錶達載體可在大腸桿菌中大量錶達GST-HBPC,Western blot和間接ELISA顯示GST-HBPC能夠特異性地與感染動物血液樣本髮生免疫反應.因此,體外重組的巴爾通體抗原蛋白HBPC可作為潛在的抗原用于巴爾通體血清學免疫檢測.
위료심조가용우파이통체(Bartonella)검측적특이성항원,이용PCR방법종파이통체하문분리주(B.tribocorum_XM)적기인조DNA중확증출혈홍소결합단백 C(HBPC)단백기강,병장해기인적편마구극륭도pGEX-4T-1원핵표체재체중,구건대GST표첨적융합단백중조표체재체,병전화대장간균(Escherichia coli DH5α),유도표체GST-HBPC,통과친화층석기술순화GST-HBPC.최후운용단문질반점인적시험(Western blot)화간접ELISA법검험GST-HBPC시부구유항원성.결과표명,소구건적표체재체가재대장간균중대량표체GST-HBPC,Western blot화간접ELISA현시GST-HBPC능구특이성지여감염동물혈액양본발생면역반응.인차,체외중조적파이통체항원단백HBPC가작위잠재적항원용우파이통체혈청학면역검측.
