中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2013年
5期
679-685
,共7页
柴宁莉%常青%徐世平%万军%吴本俨
柴寧莉%常青%徐世平%萬軍%吳本儼
시저리%상청%서세평%만군%오본엄
氧化苦参碱脂质体%肝星状细胞%双向电泳%肽质量指纹图谱分析
氧化苦參堿脂質體%肝星狀細胞%雙嚮電泳%肽質量指紋圖譜分析
양화고삼감지질체%간성상세포%쌍향전영%태질량지문도보분석
目的 应用比较蛋白质组学的方法分析氧化苦参碱(oxymatrine,OMT)脂质体作用于体外培养的肝纤维化大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)后,其蛋白表达的差异,以进一步阐明OMT脂质体对肝纤维化治疗作用的分子机制.方法 建立四氯化碳(CCl4)致慢性肝损伤纤维化的大鼠研究模型,灌流法分离获得大鼠HSCs,将P2代细胞分为A(模型组)、B(OMT脂质体处理组)、C(脂质体对照组)3组进行实验,以正常大鼠来源的HSCs作为正常对照组,作用7天后,分别提取实验组和正常对照组细胞的总蛋白质,进行等电聚焦双向电泳,建立应用OMT脂质体作用前后HSCs双向电泳差异表达谱;选取两个差异最明显的蛋白点,经肽质量指纹图谱(peptide mass fingerprinting,PMF)测定,确定差异蛋白结构和功能.结果 (1)总蛋白质点在OMT脂质体作用前后有所减少,分别为864和756个,匹配率为63％;(2)局部区域图像进行放大可得10种蛋白质在正常对照组和实验组之间具有表达差异;(3)经PMF分析和SWISS-PROT蛋白数据库检索可获得两个差异最显著蛋白点为分子量46.236 kD的ATM和54.051 kD的Miz1.结论 OMT脂质体作用于HSCs会造成其蛋白质表达的差异性,可能参与诱导其凋亡的信号途径.
目的 應用比較蛋白質組學的方法分析氧化苦參堿(oxymatrine,OMT)脂質體作用于體外培養的肝纖維化大鼠肝星狀細胞(hepatic stellate cells,HSCs)後,其蛋白錶達的差異,以進一步闡明OMT脂質體對肝纖維化治療作用的分子機製.方法 建立四氯化碳(CCl4)緻慢性肝損傷纖維化的大鼠研究模型,灌流法分離穫得大鼠HSCs,將P2代細胞分為A(模型組)、B(OMT脂質體處理組)、C(脂質體對照組)3組進行實驗,以正常大鼠來源的HSCs作為正常對照組,作用7天後,分彆提取實驗組和正常對照組細胞的總蛋白質,進行等電聚焦雙嚮電泳,建立應用OMT脂質體作用前後HSCs雙嚮電泳差異錶達譜;選取兩箇差異最明顯的蛋白點,經肽質量指紋圖譜(peptide mass fingerprinting,PMF)測定,確定差異蛋白結構和功能.結果 (1)總蛋白質點在OMT脂質體作用前後有所減少,分彆為864和756箇,匹配率為63％;(2)跼部區域圖像進行放大可得10種蛋白質在正常對照組和實驗組之間具有錶達差異;(3)經PMF分析和SWISS-PROT蛋白數據庫檢索可穫得兩箇差異最顯著蛋白點為分子量46.236 kD的ATM和54.051 kD的Miz1.結論 OMT脂質體作用于HSCs會造成其蛋白質錶達的差異性,可能參與誘導其凋亡的信號途徑.
목적 응용비교단백질조학적방법분석양화고삼감(oxymatrine,OMT)지질체작용우체외배양적간섬유화대서간성상세포(hepatic stellate cells,HSCs)후,기단백표체적차이,이진일보천명OMT지질체대간섬유화치료작용적분자궤제.방법 건립사록화탄(CCl4)치만성간손상섬유화적대서연구모형,관류법분리획득대서HSCs,장P2대세포분위A(모형조)、B(OMT지질체처리조)、C(지질체대조조)3조진행실험,이정상대서래원적HSCs작위정상대조조,작용7천후,분별제취실험조화정상대조조세포적총단백질,진행등전취초쌍향전영,건립응용OMT지질체작용전후HSCs쌍향전영차이표체보;선취량개차이최명현적단백점,경태질량지문도보(peptide mass fingerprinting,PMF)측정,학정차이단백결구화공능.결과 (1)총단백질점재OMT지질체작용전후유소감소,분별위864화756개,필배솔위63％;(2)국부구역도상진행방대가득10충단백질재정상대조조화실험조지간구유표체차이;(3)경PMF분석화SWISS-PROT단백수거고검색가획득량개차이최현저단백점위분자량46.236 kD적ATM화54.051 kD적Miz1.결론 OMT지질체작용우HSCs회조성기단백질표체적차이성,가능삼여유도기조망적신호도경.
