中国中西医结合杂志
中國中西醫結閤雜誌
중국중서의결합잡지
CHINESE JOURNAL OF INTEGRATED TRADITIONAL AND WESTERN MEDICINE
2013年
5期
674-678
,共5页
刘青松%朱兴春%李君安%邢艳%蒋红%张均%杨明辉%赵明才%袁国华
劉青鬆%硃興春%李君安%邢豔%蔣紅%張均%楊明輝%趙明纔%袁國華
류청송%주흥춘%리군안%형염%장홍%장균%양명휘%조명재%원국화
丹参注射液%类风湿关节炎%成纤维样滑膜细胞%凋亡
丹參註射液%類風濕關節炎%成纖維樣滑膜細胞%凋亡
단삼주사액%류풍습관절염%성섬유양활막세포%조망
目的 探讨丹参注射液对类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清培养的类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞(RA FLSs)增殖的影响.方法 常规培养良好的RA FLSs,传代时用10％未灭活人血清(健康人血清和RA患者血清)作用24 h后,加入终浓度为0.4 mg/mL丹参注射液,继续培养24h.以10％胎牛血清作对照,光学显微镜观察人血清培养后和丹参注射液作用后的细胞形态变化;采用MTT法分析其增殖变化;流式细胞仪检测其凋亡;提取各组总RNA并逆转录,荧光定量PCR检测Bax mRNA表达.结果 (1)无论是加入健康人血清还是RA患者血清后,细胞均能贴壁生长.相比而言胎牛血清组细胞背景较为干净,而人血清组细胞密度较胎牛血清组高,细胞形态无明显改变.(2)与胎牛血清组比较,MTT增殖实验显示,健康人血清组和RA患者血清组的吸光度(OD)值均明显增高,差异有统计学意义(P＜0.01);加终浓度为0.4 mg/mL丹参注射液后,3组不同来源血清作用的细胞均受到不同程度的抑制(OD值显著降低,P＜0.05),且健康人血清组和RA患者血清组与胎牛血清组比较,OD值显著增加,差异有统计学意义(P＜0.01),健康人血清组与RA患者血清组比较,差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).(3)与胎牛血清组比较,RA血清组凋亡率明显降低,差异有统计学意义(P＜0.01);胎牛血清组和RA患者血清组,经0.4 mg/mL丹参作用后,与相应未加丹参组比较,凋亡率均显著增加,差异有统计学意义(P ＜0.05);FLSs经0.4 mg/mL丹参作用后,与胎牛血清组比较,健康人血清组和RA患者血清组的凋亡率均显著降低,差异有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01).(4) FLSs经0.4 mg/mL丹参作用后,RA血清组和胎牛血清组Bax mRNA表达均增加,差异有统计学意义(P＜0.01);与胎牛血清组比较,健康人血清组及RA患者血清组,Bax mRNA的表达变化明显,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 (1)虽然健康人血清能更好的利于RAFLSs的生长,但对于特定疾病的细胞生物学研究,如无相应疾病患者血清前提下,胎牛血清更能反映真实结果;(2)丹参注射液可通过促进RA FLSs凋亡而抑制其增殖.
目的 探討丹參註射液對類風濕關節炎(rheumatoid arthritis,RA)患者血清培養的類風濕關節炎成纖維樣滑膜細胞(RA FLSs)增殖的影響.方法 常規培養良好的RA FLSs,傳代時用10％未滅活人血清(健康人血清和RA患者血清)作用24 h後,加入終濃度為0.4 mg/mL丹參註射液,繼續培養24h.以10％胎牛血清作對照,光學顯微鏡觀察人血清培養後和丹參註射液作用後的細胞形態變化;採用MTT法分析其增殖變化;流式細胞儀檢測其凋亡;提取各組總RNA併逆轉錄,熒光定量PCR檢測Bax mRNA錶達.結果 (1)無論是加入健康人血清還是RA患者血清後,細胞均能貼壁生長.相比而言胎牛血清組細胞揹景較為榦淨,而人血清組細胞密度較胎牛血清組高,細胞形態無明顯改變.(2)與胎牛血清組比較,MTT增殖實驗顯示,健康人血清組和RA患者血清組的吸光度(OD)值均明顯增高,差異有統計學意義(P＜0.01);加終濃度為0.4 mg/mL丹參註射液後,3組不同來源血清作用的細胞均受到不同程度的抑製(OD值顯著降低,P＜0.05),且健康人血清組和RA患者血清組與胎牛血清組比較,OD值顯著增加,差異有統計學意義(P＜0.01),健康人血清組與RA患者血清組比較,差異有統計學意義(P ＜0.05,P＜0.01).(3)與胎牛血清組比較,RA血清組凋亡率明顯降低,差異有統計學意義(P＜0.01);胎牛血清組和RA患者血清組,經0.4 mg/mL丹參作用後,與相應未加丹參組比較,凋亡率均顯著增加,差異有統計學意義(P ＜0.05);FLSs經0.4 mg/mL丹參作用後,與胎牛血清組比較,健康人血清組和RA患者血清組的凋亡率均顯著降低,差異有統計學意義(P ＜0.05,P＜0.01).(4) FLSs經0.4 mg/mL丹參作用後,RA血清組和胎牛血清組Bax mRNA錶達均增加,差異有統計學意義(P＜0.01);與胎牛血清組比較,健康人血清組及RA患者血清組,Bax mRNA的錶達變化明顯,差異有統計學意義(P＜0.01).結論 (1)雖然健康人血清能更好的利于RAFLSs的生長,但對于特定疾病的細胞生物學研究,如無相應疾病患者血清前提下,胎牛血清更能反映真實結果;(2)丹參註射液可通過促進RA FLSs凋亡而抑製其增殖.
목적 탐토단삼주사액대류풍습관절염(rheumatoid arthritis,RA)환자혈청배양적류풍습관절염성섬유양활막세포(RA FLSs)증식적영향.방법 상규배양량호적RA FLSs,전대시용10％미멸활인혈청(건강인혈청화RA환자혈청)작용24 h후,가입종농도위0.4 mg/mL단삼주사액,계속배양24h.이10％태우혈청작대조,광학현미경관찰인혈청배양후화단삼주사액작용후적세포형태변화;채용MTT법분석기증식변화;류식세포의검측기조망;제취각조총RNA병역전록,형광정량PCR검측Bax mRNA표체.결과 (1)무론시가입건강인혈청환시RA환자혈청후,세포균능첩벽생장.상비이언태우혈청조세포배경교위간정,이인혈청조세포밀도교태우혈청조고,세포형태무명현개변.(2)여태우혈청조비교,MTT증식실험현시,건강인혈청조화RA환자혈청조적흡광도(OD)치균명현증고,차이유통계학의의(P＜0.01);가종농도위0.4 mg/mL단삼주사액후,3조불동래원혈청작용적세포균수도불동정도적억제(OD치현저강저,P＜0.05),차건강인혈청조화RA환자혈청조여태우혈청조비교,OD치현저증가,차이유통계학의의(P＜0.01),건강인혈청조여RA환자혈청조비교,차이유통계학의의(P ＜0.05,P＜0.01).(3)여태우혈청조비교,RA혈청조조망솔명현강저,차이유통계학의의(P＜0.01);태우혈청조화RA환자혈청조,경0.4 mg/mL단삼작용후,여상응미가단삼조비교,조망솔균현저증가,차이유통계학의의(P ＜0.05);FLSs경0.4 mg/mL단삼작용후,여태우혈청조비교,건강인혈청조화RA환자혈청조적조망솔균현저강저,차이유통계학의의(P ＜0.05,P＜0.01).(4) FLSs경0.4 mg/mL단삼작용후,RA혈청조화태우혈청조Bax mRNA표체균증가,차이유통계학의의(P＜0.01);여태우혈청조비교,건강인혈청조급RA환자혈청조,Bax mRNA적표체변화명현,차이유통계학의의(P＜0.01).결론 (1)수연건강인혈청능경호적리우RAFLSs적생장,단대우특정질병적세포생물학연구,여무상응질병환자혈청전제하,태우혈청경능반영진실결과;(2)단삼주사액가통과촉진RA FLSs조망이억제기증식.
