上海交通大学学报（农业科学版）
上海交通大學學報（農業科學版）
상해교통대학학보（농업과학판）
JOURNAL OF SHANGHAI JIAOTONG UNIVERSITY(AGRICULTURAL SCIENCE)
2012年
4期
25-30
,共6页
杨曦%吉文汇%曹冬梅%孙建和%严亚贤
楊晞%吉文彙%曹鼕梅%孫建和%嚴亞賢
양희%길문회%조동매%손건화%엄아현
大肠杆菌O157%Stx2噬菌体%裂解酶%酶活性
大腸桿菌O157%Stx2噬菌體%裂解酶%酶活性
대장간균O157%Stx2서균체%렬해매%매활성
为研究大肠杆菌O157 Stx噬菌体编码的裂解酶(内溶素)对肠出血性大肠杆菌的抗菌作用,克隆表达了大肠杆菌O157 Stx噬菌体裂解酶,并检测其裂解作用和裂菌谱.利用PCR方法扩增大肠杆菌O157 Min27株中Stx2噬菌体裂解酶基因(R基因),构建表达质粒pET28a(+)—lysEC1,并转化至大肠杆菌BL21 (DE3).重组质粒在BL21中获得了高表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的34％,经His-trapTM亲和层析柱纯化后,获得的重组LysEC1的纯度大于97％.体外裂解活性试验证实纯化的噬菌体裂解酶LysEC1对肠出血性大肠杆菌菌株具有很好的裂解作用,这为新型噬菌体抗菌生物制剂的研发提供了新的研发方向.
為研究大腸桿菌O157 Stx噬菌體編碼的裂解酶(內溶素)對腸齣血性大腸桿菌的抗菌作用,剋隆錶達瞭大腸桿菌O157 Stx噬菌體裂解酶,併檢測其裂解作用和裂菌譜.利用PCR方法擴增大腸桿菌O157 Min27株中Stx2噬菌體裂解酶基因(R基因),構建錶達質粒pET28a(+)—lysEC1,併轉化至大腸桿菌BL21 (DE3).重組質粒在BL21中穫得瞭高錶達,目的蛋白錶達量佔菌體總蛋白的34％,經His-trapTM親和層析柱純化後,穫得的重組LysEC1的純度大于97％.體外裂解活性試驗證實純化的噬菌體裂解酶LysEC1對腸齣血性大腸桿菌菌株具有很好的裂解作用,這為新型噬菌體抗菌生物製劑的研髮提供瞭新的研髮方嚮.
위연구대장간균O157 Stx서균체편마적렬해매(내용소)대장출혈성대장간균적항균작용,극륭표체료대장간균O157 Stx서균체렬해매,병검측기렬해작용화렬균보.이용PCR방법확증대장간균O157 Min27주중Stx2서균체렬해매기인(R기인),구건표체질립pET28a(+)—lysEC1,병전화지대장간균BL21 (DE3).중조질립재BL21중획득료고표체,목적단백표체량점균체총단백적34％,경His-trapTM친화층석주순화후,획득적중조LysEC1적순도대우97％.체외렬해활성시험증실순화적서균체렬해매LysEC1대장출혈성대장간균균주구유흔호적렬해작용,저위신형서균체항균생물제제적연발제공료신적연발방향.
