肝脏
肝髒
간장
CHINESE HEPATOLOGY
2012年
11期
766-770,774
,共6页
许彪%陈婧%胡瑾华%徐东平%王业东%王慧芬
許彪%陳婧%鬍瑾華%徐東平%王業東%王慧芬
허표%진청%호근화%서동평%왕업동%왕혜분
肝脏%裸DNA%高通量注射%凋亡%Fas配体
肝髒%裸DNA%高通量註射%凋亡%Fas配體
간장%라DNA%고통량주사%조망%Fas배체
目的 建立经门静脉高通量注射将裸DNA质粒导入大鼠肝脏表达的实验方法,观察FasL在肝脏的表达、对肝损伤及肝功能生化指标变化的影响.方法 对大鼠经门静脉高通量注射质粒pDC316-LacZ,观察LacZ基因在大鼠肝脏的表达情况.将11只大鼠随机分为实验组6只(注射pDC315-rFasL),对照组5只(注射pDC316-LacZ),经门静脉高通量注射将大鼠FasL真核质粒导入大鼠肝脏.分别于术后第1、3～4、6天处死大鼠,术前、术后取血查ALT和AST,肝组织进行RT-PCR、Western印迹及常规HE染色和免疫组织化学实验.结果 经门静脉高通量注射了pDC316-LacZ的大鼠肝脏,可观察到蓝色沉淀物质在肝组织表达.经门静脉将FasL质粒导入大鼠肝脏,24 h后取肝组织通过RT-PCR和Western印迹实验证实FasL在肝脏中表达.免疫组织化学结果表明在术后实验组肝组织大量表达FasL.常规HE染色显示实验组术后肝小叶中肝细胞嗜酸性变及凋亡小体明显高于对照组.术后第1天实验组与对照组ALT、AST水平显著升高.第3～4天对照组恢复正常,但实验组于术后第6天才基本正常.结论 初步建立了门静脉高通量注射将裸DNA质粒导入大鼠肝脏表达的实验方法.肝细胞表达FasL可能成为效应细胞致邻近肝细胞凋亡.
目的 建立經門靜脈高通量註射將裸DNA質粒導入大鼠肝髒錶達的實驗方法,觀察FasL在肝髒的錶達、對肝損傷及肝功能生化指標變化的影響.方法 對大鼠經門靜脈高通量註射質粒pDC316-LacZ,觀察LacZ基因在大鼠肝髒的錶達情況.將11隻大鼠隨機分為實驗組6隻(註射pDC315-rFasL),對照組5隻(註射pDC316-LacZ),經門靜脈高通量註射將大鼠FasL真覈質粒導入大鼠肝髒.分彆于術後第1、3～4、6天處死大鼠,術前、術後取血查ALT和AST,肝組織進行RT-PCR、Western印跡及常規HE染色和免疫組織化學實驗.結果 經門靜脈高通量註射瞭pDC316-LacZ的大鼠肝髒,可觀察到藍色沉澱物質在肝組織錶達.經門靜脈將FasL質粒導入大鼠肝髒,24 h後取肝組織通過RT-PCR和Western印跡實驗證實FasL在肝髒中錶達.免疫組織化學結果錶明在術後實驗組肝組織大量錶達FasL.常規HE染色顯示實驗組術後肝小葉中肝細胞嗜痠性變及凋亡小體明顯高于對照組.術後第1天實驗組與對照組ALT、AST水平顯著升高.第3～4天對照組恢複正常,但實驗組于術後第6天纔基本正常.結論 初步建立瞭門靜脈高通量註射將裸DNA質粒導入大鼠肝髒錶達的實驗方法.肝細胞錶達FasL可能成為效應細胞緻鄰近肝細胞凋亡.
목적 건립경문정맥고통량주사장라DNA질립도입대서간장표체적실험방법,관찰FasL재간장적표체、대간손상급간공능생화지표변화적영향.방법 대대서경문정맥고통량주사질립pDC316-LacZ,관찰LacZ기인재대서간장적표체정황.장11지대서수궤분위실험조6지(주사pDC315-rFasL),대조조5지(주사pDC316-LacZ),경문정맥고통량주사장대서FasL진핵질립도입대서간장.분별우술후제1、3～4、6천처사대서,술전、술후취혈사ALT화AST,간조직진행RT-PCR、Western인적급상규HE염색화면역조직화학실험.결과 경문정맥고통량주사료pDC316-LacZ적대서간장,가관찰도람색침정물질재간조직표체.경문정맥장FasL질립도입대서간장,24 h후취간조직통과RT-PCR화Western인적실험증실FasL재간장중표체.면역조직화학결과표명재술후실험조간조직대량표체FasL.상규HE염색현시실험조술후간소협중간세포기산성변급조망소체명현고우대조조.술후제1천실험조여대조조ALT、AST수평현저승고.제3～4천대조조회복정상,단실험조우술후제6천재기본정상.결론 초보건립료문정맥고통량주사장라DNA질립도입대서간장표체적실험방법.간세포표체FasL가능성위효응세포치린근간세포조망.
