西部医学
西部醫學
서부의학
MEDICAL JOURNAL OF WEST CHINA
2012年
12期
2253-2257
,共5页
人肉芽组织%成纤维细胞%体外培养
人肉芽組織%成纖維細胞%體外培養
인육아조직%성섬유세포%체외배양
目的 建立稳定的人肉芽组织成纤维细胞体外分离、培养体系,并探讨其生物学特性,为进一步研究成纤维细胞在人创面愈合中的作用提供参考.方法 采用机械法和酶消化法分离培养人创面肉芽组织成纤维细胞,倒置相差显微镜下观察细胞形态及增值情况；分别绘制第3、5、10代细胞生长曲线.应用流式细胞仪(FCM)检测第3代细胞表面标志CD105、CD73、CD90、CD44、CD34、CD45、CD19、CD11b及HLA-DR的表达.取第3代细胞行免疫细胞化学检测vimentin和CK19的表达情况.结果 原代培养出的成纤维细胞呈短梭形、多角形或不规则形；体外培养连续多次传代后获得形态较均一的成纤维细胞,以梭形为主,细胞呈放射状排列；细胞增殖良好,第3、5、0代细胞增殖能力无明显差异,有明显的指数生长期,体外能长期培养存活,并保持不分化状态.流式细胞仪检测细胞高表达CD105、CD73、CD90、CD44等间充质干细胞表面标志,不表达CD34、CD45、CD19、CD11b、HLA-DR等造血干细胞表面标志.免疫细胞化学检测vimentin阳性表达,CK19阴性表达.结论 建立了稳定的人创面肉芽组织成纤维细胞体外分离、培养体系,获得的成纤维细胞表现出间充质干细胞的CD分子表型,有可能在皮肤创面修复中发挥重要作用.
目的 建立穩定的人肉芽組織成纖維細胞體外分離、培養體繫,併探討其生物學特性,為進一步研究成纖維細胞在人創麵愈閤中的作用提供參攷.方法 採用機械法和酶消化法分離培養人創麵肉芽組織成纖維細胞,倒置相差顯微鏡下觀察細胞形態及增值情況；分彆繪製第3、5、10代細胞生長麯線.應用流式細胞儀(FCM)檢測第3代細胞錶麵標誌CD105、CD73、CD90、CD44、CD34、CD45、CD19、CD11b及HLA-DR的錶達.取第3代細胞行免疫細胞化學檢測vimentin和CK19的錶達情況.結果 原代培養齣的成纖維細胞呈短梭形、多角形或不規則形；體外培養連續多次傳代後穫得形態較均一的成纖維細胞,以梭形為主,細胞呈放射狀排列；細胞增殖良好,第3、5、0代細胞增殖能力無明顯差異,有明顯的指數生長期,體外能長期培養存活,併保持不分化狀態.流式細胞儀檢測細胞高錶達CD105、CD73、CD90、CD44等間充質榦細胞錶麵標誌,不錶達CD34、CD45、CD19、CD11b、HLA-DR等造血榦細胞錶麵標誌.免疫細胞化學檢測vimentin暘性錶達,CK19陰性錶達.結論 建立瞭穩定的人創麵肉芽組織成纖維細胞體外分離、培養體繫,穫得的成纖維細胞錶現齣間充質榦細胞的CD分子錶型,有可能在皮膚創麵脩複中髮揮重要作用.
목적 건립은정적인육아조직성섬유세포체외분리、배양체계,병탐토기생물학특성,위진일보연구성섬유세포재인창면유합중적작용제공삼고.방법 채용궤계법화매소화법분리배양인창면육아조직성섬유세포,도치상차현미경하관찰세포형태급증치정황；분별회제제3、5、10대세포생장곡선.응용류식세포의(FCM)검측제3대세포표면표지CD105、CD73、CD90、CD44、CD34、CD45、CD19、CD11b급HLA-DR적표체.취제3대세포행면역세포화학검측vimentin화CK19적표체정황.결과 원대배양출적성섬유세포정단사형、다각형혹불규칙형；체외배양련속다차전대후획득형태교균일적성섬유세포,이사형위주,세포정방사상배렬；세포증식량호,제3、5、0대세포증식능력무명현차이,유명현적지수생장기,체외능장기배양존활,병보지불분화상태.류식세포의검측세포고표체CD105、CD73、CD90、CD44등간충질간세포표면표지,불표체CD34、CD45、CD19、CD11b、HLA-DR등조혈간세포표면표지.면역세포화학검측vimentin양성표체,CK19음성표체.결론 건립료은정적인창면육아조직성섬유세포체외분리、배양체계,획득적성섬유세포표현출간충질간세포적CD분자표형,유가능재피부창면수복중발휘중요작용.
