重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2013年
23期
2703-2705,2709
,共4页
王娜%冷弘%燕备战%王媛媛%臧文巧%李敏%赵国强
王娜%冷弘%燕備戰%王媛媛%臧文巧%李敏%趙國彊
왕나%랭홍%연비전%왕원원%장문교%리민%조국강
HHV-8%ORF59,ORF65,K8.1%融合抗原%融合PCR
HHV-8%ORF59,ORF65,K8.1%融閤抗原%融閤PCR
HHV-8%ORF59,ORF65,K8.1%융합항원%융합PCR
HHV-8%ORF59,ORF65,K8 .1%fusion antigen%fusion PCR
目的构建人疱疹病毒8型(HHV-8)融合蛋白原核表达载体,为诊断 HHV-8感染奠定基础。方法构建 HHV-8融合蛋白原核表达载体转化大肠杆菌DH5α,诱导表达融合蛋白ORF59-ORF65-K8.1。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和免疫印迹(Western blot)法鉴定融合蛋白。融合蛋白对无偿献血人员血清进行检测。结果 SDS-PAGE显示融合蛋白约24 KD ,与预期值一致;Western blot提示该融合蛋白可以和 HHV-8阳性血清特异性结合。融合蛋白包被酶连免疫吸附实验(ELISA)板后与无偿献血人员血清反应检测 HHV-8感染情况,检测结果与市售 HHV-8 ELISA试剂盒检测结果一致。结论本文构建的融合蛋白可作为 HHV-8感染的检测抗原用来筛查献血人员 HHV-8感染情况及普通人群 HHV-8感染流行病学调查。
目的構建人皰疹病毒8型(HHV-8)融閤蛋白原覈錶達載體,為診斷 HHV-8感染奠定基礎。方法構建 HHV-8融閤蛋白原覈錶達載體轉化大腸桿菌DH5α,誘導錶達融閤蛋白ORF59-ORF65-K8.1。聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)和免疫印跡(Western blot)法鑒定融閤蛋白。融閤蛋白對無償獻血人員血清進行檢測。結果 SDS-PAGE顯示融閤蛋白約24 KD ,與預期值一緻;Western blot提示該融閤蛋白可以和 HHV-8暘性血清特異性結閤。融閤蛋白包被酶連免疫吸附實驗(ELISA)闆後與無償獻血人員血清反應檢測 HHV-8感染情況,檢測結果與市售 HHV-8 ELISA試劑盒檢測結果一緻。結論本文構建的融閤蛋白可作為 HHV-8感染的檢測抗原用來篩查獻血人員 HHV-8感染情況及普通人群 HHV-8感染流行病學調查。
목적구건인포진병독8형(HHV-8)융합단백원핵표체재체,위진단 HHV-8감염전정기출。방법구건 HHV-8융합단백원핵표체재체전화대장간균DH5α,유도표체융합단백ORF59-ORF65-K8.1。취병희선알응효전영(SDS-PAGE)화면역인적(Western blot)법감정융합단백。융합단백대무상헌혈인원혈청진행검측。결과 SDS-PAGE현시융합단백약24 KD ,여예기치일치;Western blot제시해융합단백가이화 HHV-8양성혈청특이성결합。융합단백포피매련면역흡부실험(ELISA)판후여무상헌혈인원혈청반응검측 HHV-8감염정황,검측결과여시수 HHV-8 ELISA시제합검측결과일치。결론본문구건적융합단백가작위 HHV-8감염적검측항원용래사사헌혈인원 HHV-8감염정황급보통인군 HHV-8감염류행병학조사。
Objective To construct the prokaryotic expression plasmid of HHV-8 fusion antigen for diagnosis of HHV-8 infec-tion .Methods The combined fragment ORF59 ,ORF65 and K8 .1 by fusion PCR was integrated into pQE-80L and transfected into E .coli DH5α.Fusion protein was induced to express by IPTG .SDS-PAGE and Western blot were employed to detect the fusion protein .Fusion protein was used to detect serum of blood donors .Results The combined plasmid pQE-80L-ORF59-ORF65-K8 .1 was constructed successfully after verifying by restriction enzyme digestion and sequencing .The fusion protein was about 24 KD and could be specific combined with HHV-8 positive serum .The fusion protein had the same result to detect HHV-8 with the HHV-8 ELISA kit .Conclusion Fusion protein we construct can be used as diagnosis antigen to detect HHV-8 of blood donors and common people .