南方医科大学学报
南方醫科大學學報
남방의과대학학보
JOURNAL OF SOUTHERN MEDICAL UNIVERSITY
2013年
4期
582-585
,共4页
钟文%何本夫%全天一%朱成全%周思朗%陈永乐
鐘文%何本伕%全天一%硃成全%週思朗%陳永樂
종문%하본부%전천일%주성전%주사랑%진영악
miR-143%鼻咽癌%逆转录病毒%稳定细胞系%黏附
miR-143%鼻嚥癌%逆轉錄病毒%穩定細胞繫%黏附
miR-143%비인암%역전록병독%은정세포계%점부
目的 检测鼻咽癌细胞系中miR-143表达情况,建立稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,为研究其在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制提供可靠的细胞模型.方法 采用QPCR方法检测鼻咽癌细胞系CEN1、CNE2、HONE1、5-8F、6-10B及人永生化鼻咽上皮细胞NP69中miR-143的表达水平.构建重组逆转录病毒质粒pMSCV-puro-miR-143,包装逆转录病毒pMSCV-miR-143和pMSCV-Vector并感染鼻咽癌细胞,建立稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,并应用细胞黏附实验检测过表达mir-143后,鼻咽癌细胞对胞外基质的黏附性.结果 鼻咽癌细胞系中miR-143的表达水平均低于对照组NP69细胞,其中高转移潜能细胞株5-8F的表达量最低,仅为对照组的3.03％,成瘤但不转移细胞株6-10B表达量最高,为对照组的63.59％.实时荧光定量PCR显示筛选后第7代细胞miR-143的表达水平比对照组高出达1080倍(P＜0.05).细胞黏附实验结果显示,过表达mir-143可降低5-8F细胞对胞外基质的黏附性.结论 miR-143在鼻咽癌细胞系中表达失常,其作用可能与鼻咽癌细胞的侵袭和转移相关；成功建立了稳定高表达miR-143的鼻咽癌细胞系,并初步确定miR-143能抑制5-8F细胞的黏附能力,为探索miR-143在鼻咽癌的发生和发展中的作用机制奠定了实验基础.
目的 檢測鼻嚥癌細胞繫中miR-143錶達情況,建立穩定高錶達miR-143的鼻嚥癌細胞繫,為研究其在鼻嚥癌的髮生和髮展中的作用機製提供可靠的細胞模型.方法 採用QPCR方法檢測鼻嚥癌細胞繫CEN1、CNE2、HONE1、5-8F、6-10B及人永生化鼻嚥上皮細胞NP69中miR-143的錶達水平.構建重組逆轉錄病毒質粒pMSCV-puro-miR-143,包裝逆轉錄病毒pMSCV-miR-143和pMSCV-Vector併感染鼻嚥癌細胞,建立穩定高錶達miR-143的鼻嚥癌細胞繫,併應用細胞黏附實驗檢測過錶達mir-143後,鼻嚥癌細胞對胞外基質的黏附性.結果 鼻嚥癌細胞繫中miR-143的錶達水平均低于對照組NP69細胞,其中高轉移潛能細胞株5-8F的錶達量最低,僅為對照組的3.03％,成瘤但不轉移細胞株6-10B錶達量最高,為對照組的63.59％.實時熒光定量PCR顯示篩選後第7代細胞miR-143的錶達水平比對照組高齣達1080倍(P＜0.05).細胞黏附實驗結果顯示,過錶達mir-143可降低5-8F細胞對胞外基質的黏附性.結論 miR-143在鼻嚥癌細胞繫中錶達失常,其作用可能與鼻嚥癌細胞的侵襲和轉移相關；成功建立瞭穩定高錶達miR-143的鼻嚥癌細胞繫,併初步確定miR-143能抑製5-8F細胞的黏附能力,為探索miR-143在鼻嚥癌的髮生和髮展中的作用機製奠定瞭實驗基礎.
목적 검측비인암세포계중miR-143표체정황,건립은정고표체miR-143적비인암세포계,위연구기재비인암적발생화발전중적작용궤제제공가고적세포모형.방법 채용QPCR방법검측비인암세포계CEN1、CNE2、HONE1、5-8F、6-10B급인영생화비인상피세포NP69중miR-143적표체수평.구건중조역전록병독질립pMSCV-puro-miR-143,포장역전록병독pMSCV-miR-143화pMSCV-Vector병감염비인암세포,건립은정고표체miR-143적비인암세포계,병응용세포점부실험검측과표체mir-143후,비인암세포대포외기질적점부성.결과 비인암세포계중miR-143적표체수평균저우대조조NP69세포,기중고전이잠능세포주5-8F적표체량최저,부위대조조적3.03％,성류단불전이세포주6-10B표체량최고,위대조조적63.59％.실시형광정량PCR현시사선후제7대세포miR-143적표체수평비대조조고출체1080배(P＜0.05).세포점부실험결과현시,과표체mir-143가강저5-8F세포대포외기질적점부성.결론 miR-143재비인암세포계중표체실상,기작용가능여비인암세포적침습화전이상관；성공건립료은정고표체miR-143적비인암세포계,병초보학정miR-143능억제5-8F세포적점부능력,위탐색miR-143재비인암적발생화발전중적작용궤제전정료실험기출.
