医学研究生学报
醫學研究生學報
의학연구생학보
JOURNAL OF MEDICAL POSTGRADUATE
2014年
2期
151-156
,共6页
王珺
%马学娟%郑灵芝%赵琴%应小燕
王珺
%馬學娟%鄭靈芝%趙琴%應小燕
왕군
%마학연%정령지%조금%응소연
siRNA%白血病抑制因子%整合素ανβ3%子宫内膜细胞
siRNA%白血病抑製因子%整閤素ανβ3%子宮內膜細胞
siRNA%백혈병억제인자%정합소ανβ3%자궁내막세포
Small interfering RNA%Leukemia inhibitor factor%Integrin-ανβ3%Endothelial cell
目的 白血病抑制因子(leukemia inhibitor factor,LIF)及整合素ανβ3 被认为是子宫内膜容受性的标记分子.探讨小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)对LIF的抑制效应及该效应对整合素ανβ3表达的影响.方法 化学合成3条LIF siRNA(LIFsiRNA-1、LIFsiRNA-2和LIFsiRNA-3),用脂质体法转染到小鼠子宫内膜细胞中,实时荧光定量PCR筛选出最佳干扰片段和最优转染浓度,RT-PCR检测整合素ανβ3 mRNA的表达水平,ELISA法检测细胞培养液中LIF蛋白,Western blot检测整合素ανβ3蛋白,从蛋白水平进行相关性分析.结果 siRNA转染后,LIFsiRNA-1 mRNA表达下调最明显(0.26±0.09),差异有统计学意义(P<0.01),且在一定范围内呈剂量依赖性,选择最优转染浓度70nmol/mL,整合素ανβ3 mRNA表达明显下降(0.53±0.23),差异有统计学意义(P<0.01);LIF蛋白[(2.47±0.03)ng/mL]及整合素ανβ3蛋白[(0.16±0.08)ng/mL]表达较对照组显著下调,差异有统计学意义(P<0.01).结论 LIFsiRNA-1可很好地抑制LIF的表达,而LIF的沉默表达能有效抑制整合素ανβ3的表达,LIF和整合素ανβ3具有显著正相关性(P<0.01).
目的 白血病抑製因子(leukemia inhibitor factor,LIF)及整閤素ανβ3 被認為是子宮內膜容受性的標記分子.探討小榦擾RNA(small interference RNA,siRNA)對LIF的抑製效應及該效應對整閤素ανβ3錶達的影響.方法 化學閤成3條LIF siRNA(LIFsiRNA-1、LIFsiRNA-2和LIFsiRNA-3),用脂質體法轉染到小鼠子宮內膜細胞中,實時熒光定量PCR篩選齣最佳榦擾片段和最優轉染濃度,RT-PCR檢測整閤素ανβ3 mRNA的錶達水平,ELISA法檢測細胞培養液中LIF蛋白,Western blot檢測整閤素ανβ3蛋白,從蛋白水平進行相關性分析.結果 siRNA轉染後,LIFsiRNA-1 mRNA錶達下調最明顯(0.26±0.09),差異有統計學意義(P<0.01),且在一定範圍內呈劑量依賴性,選擇最優轉染濃度70nmol/mL,整閤素ανβ3 mRNA錶達明顯下降(0.53±0.23),差異有統計學意義(P<0.01);LIF蛋白[(2.47±0.03)ng/mL]及整閤素ανβ3蛋白[(0.16±0.08)ng/mL]錶達較對照組顯著下調,差異有統計學意義(P<0.01).結論 LIFsiRNA-1可很好地抑製LIF的錶達,而LIF的沉默錶達能有效抑製整閤素ανβ3的錶達,LIF和整閤素ανβ3具有顯著正相關性(P<0.01).
목적 백혈병억제인자(leukemia inhibitor factor,LIF)급정합소ανβ3 피인위시자궁내막용수성적표기분자.탐토소간우RNA(small interference RNA,siRNA)대LIF적억제효응급해효응대정합소ανβ3표체적영향.방법 화학합성3조LIF siRNA(LIFsiRNA-1、LIFsiRNA-2화LIFsiRNA-3),용지질체법전염도소서자궁내막세포중,실시형광정량PCR사선출최가간우편단화최우전염농도,RT-PCR검측정합소ανβ3 mRNA적표체수평,ELISA법검측세포배양액중LIF단백,Western blot검측정합소ανβ3단백,종단백수평진행상관성분석.결과 siRNA전염후,LIFsiRNA-1 mRNA표체하조최명현(0.26±0.09),차이유통계학의의(P<0.01),차재일정범위내정제량의뢰성,선택최우전염농도70nmol/mL,정합소ανβ3 mRNA표체명현하강(0.53±0.23),차이유통계학의의(P<0.01);LIF단백[(2.47±0.03)ng/mL]급정합소ανβ3단백[(0.16±0.08)ng/mL]표체교대조조현저하조,차이유통계학의의(P<0.01).결론 LIFsiRNA-1가흔호지억제LIF적표체,이LIF적침묵표체능유효억제정합소ανβ3적표체,LIF화정합소ανβ3구유현저정상관성(P<0.01).
