广州医学院学报
廣州醫學院學報
엄주의학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF GUANGZHOU MEDICAL COLLEGE
2013年
5期
13-16
,共4页
赖德华%沈粤春%赵超尘%吴阳%王晓明%李君
賴德華%瀋粵春%趙超塵%吳暘%王曉明%李君
뢰덕화%침월춘%조초진%오양%왕효명%리군
载体构建%ScFv%His标签%融合基因%乳腺肿瘤
載體構建%ScFv%His標籤%融閤基因%乳腺腫瘤
재체구건%ScFv%His표첨%융합기인%유선종류
Construction of vector%ScFv%His tag%fusion gene%breast cancer
目的:构建表达抗p185且含His标签的ScFv的真核表达载体.方法:通过PCR自pcDNA-H520C9ScFv-hIL-2质粒中获得H520C9ScFv片段,将此片段插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中;设计引物在ScFv片段C端增加His标签和凝血酶识别序列,再与质粒pcDNA3.1(+)连接,将所得的融合基因进行限制性内切酶EcoR I、Hind Ⅲ双酶切及琼脂糖凝胶电泳鉴定,并测定目的序列.结果:成功将H520C9ScFv片段、His标签和凝血酶识别序列插入真核表达质粒pcDNA3.1(+)中.结论:成功构建了真核表达载体pcDNA3.1-His-ScFv,为下一步在真核细胞中表达和纯化抗p185单抗奠定基础.
目的:構建錶達抗p185且含His標籤的ScFv的真覈錶達載體.方法:通過PCR自pcDNA-H520C9ScFv-hIL-2質粒中穫得H520C9ScFv片段,將此片段插入真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)中;設計引物在ScFv片段C耑增加His標籤和凝血酶識彆序列,再與質粒pcDNA3.1(+)連接,將所得的融閤基因進行限製性內切酶EcoR I、Hind Ⅲ雙酶切及瓊脂糖凝膠電泳鑒定,併測定目的序列.結果:成功將H520C9ScFv片段、His標籤和凝血酶識彆序列插入真覈錶達質粒pcDNA3.1(+)中.結論:成功構建瞭真覈錶達載體pcDNA3.1-His-ScFv,為下一步在真覈細胞中錶達和純化抗p185單抗奠定基礎.
목적:구건표체항p185차함His표첨적ScFv적진핵표체재체.방법:통과PCR자pcDNA-H520C9ScFv-hIL-2질립중획득H520C9ScFv편단,장차편단삽입진핵표체질립pcDNA3.1(+)중;설계인물재ScFv편단C단증가His표첨화응혈매식별서렬,재여질립pcDNA3.1(+)련접,장소득적융합기인진행한제성내절매EcoR I、Hind Ⅲ쌍매절급경지당응효전영감정,병측정목적서렬.결과:성공장H520C9ScFv편단、His표첨화응혈매식별서렬삽입진핵표체질립pcDNA3.1(+)중.결론:성공구건료진핵표체재체pcDNA3.1-His-ScFv,위하일보재진핵세포중표체화순화항p185단항전정기출.
