广州医学院学报
廣州醫學院學報
엄주의학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF GUANGZHOU MEDICAL COLLEGE
2013年
5期
1-4
,共4页
王飞%朱郇悯%韦雪梅%刘嘉熙%汤娟娟%王嘉雯%黎银燕%陈晓湘%李孜
王飛%硃郇憫%韋雪梅%劉嘉熙%湯娟娟%王嘉雯%黎銀燕%陳曉湘%李孜
왕비%주순민%위설매%류가희%탕연연%왕가문%려은연%진효상%리자
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体%肺癌%药物敏感度
腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體%肺癌%藥物敏感度
종류배사인자상관조망유도배체%폐암%약물민감도
Recombinant tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand%lung carcinoma%drug sensitivity
目的:表达、纯化重组肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的活性片段,并观察其对非小细胞肺癌细胞株的杀伤活性.方法:利用已有的pGEx-4T-1/TRAIL重组质粒转化BL21/DE3菌;异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达谷胱甘肽转移酶(GST)标签的TRAIL,用GST-BIND树脂亲和层析柱纯化;SDS-PAGE电泳分析纯化结果;蛋白质超滤除盐、浓缩TRAIL;Bradford法定量.形态学观察肺癌细胞;乳酸脱氢酶(LDH)释放法确定TRAIL对肺癌细胞的杀伤活性.结果:共获得8.6 mg纯化TRAIL,其对A549、SPC-A1、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460等7株细胞株的IC50值分别为(2.33±0.22) μg/mL、(50.0±17.0)、(872.0±241.0)、(427.0±12.0)、(328.0±28.0)、(270.0±33.0)、(178.0±8.0) ng/mL.结论:相同组织类型的不同肺癌细胞株对重组TRAIL的敏感度不同,从低到高依次为A549、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460和SPCA1.
目的:錶達、純化重組腫瘤壞死因子相關凋亡誘導配體(TRAIL)的活性片段,併觀察其對非小細胞肺癌細胞株的殺傷活性.方法:利用已有的pGEx-4T-1/TRAIL重組質粒轉化BL21/DE3菌;異丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導錶達穀胱甘肽轉移酶(GST)標籤的TRAIL,用GST-BIND樹脂親和層析柱純化;SDS-PAGE電泳分析純化結果;蛋白質超濾除鹽、濃縮TRAIL;Bradford法定量.形態學觀察肺癌細胞;乳痠脫氫酶(LDH)釋放法確定TRAIL對肺癌細胞的殺傷活性.結果:共穫得8.6 mg純化TRAIL,其對A549、SPC-A1、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460等7株細胞株的IC50值分彆為(2.33±0.22) μg/mL、(50.0±17.0)、(872.0±241.0)、(427.0±12.0)、(328.0±28.0)、(270.0±33.0)、(178.0±8.0) ng/mL.結論:相同組織類型的不同肺癌細胞株對重組TRAIL的敏感度不同,從低到高依次為A549、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460和SPCA1.
목적:표체、순화중조종류배사인자상관조망유도배체(TRAIL)적활성편단,병관찰기대비소세포폐암세포주적살상활성.방법:이용이유적pGEx-4T-1/TRAIL중조질립전화BL21/DE3균;이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도표체곡광감태전이매(GST)표첨적TRAIL,용GST-BIND수지친화층석주순화;SDS-PAGE전영분석순화결과;단백질초려제염、농축TRAIL;Bradford법정량.형태학관찰폐암세포;유산탈경매(LDH)석방법학정TRAIL대폐암세포적살상활성.결과:공획득8.6 mg순화TRAIL,기대A549、SPC-A1、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460등7주세포주적IC50치분별위(2.33±0.22) μg/mL、(50.0±17.0)、(872.0±241.0)、(427.0±12.0)、(328.0±28.0)、(270.0±33.0)、(178.0±8.0) ng/mL.결론:상동조직류형적불동폐암세포주대중조TRAIL적민감도불동,종저도고의차위A549、HLAMP、95D、PGCL3、95C、H460화SPCA1.
