广东药学院学报
廣東藥學院學報
엄동약학원학보
ACADEMIC JOURNAL OF GUANGDONG COLLEGE OF PHARMACY
2014年
1期
85-91
,共7页
非病毒基因载体%端羧基聚乙二醇/鱼精蛋白%HSV-TK%基因治疗%体外
非病毒基因載體%耑羧基聚乙二醇/魚精蛋白%HSV-TK%基因治療%體外
비병독기인재체%단최기취을이순/어정단백%HSV-TK%기인치료%체외
nonviral gene carrier%MPEG-C-protamine system%HSV-TK%gene therapy%in vitro
目的 研究非病毒载体MPEG-C-鱼精蛋白系统的制备方法、其对不同剂量鱼精蛋白与单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)的结合能力以及对HeLa细胞的影响.方法 将一定量的MPEG-C-和不同量的鱼精蛋白混合后与DNA室温孵育,得到MPEG-C-鱼精蛋白/DNA复合物;用琼脂糖电泳实验测定不同N/P比形成复合物时对HSV-TK的阻滞情况; 用结合沉淀试验比较不同量鱼精蛋白对包裹HSV-TK的能力的影响;MTT 法检测MPEG-C-鱼精蛋白对HeLa 宫颈癌细胞的毒性作用及其复合物对HeLa细胞的转染率.结果 MPEG-C-鱼精蛋白复合物包裹HSV-TK的能力随N/P比增大而增强;粒径随N/P比增大而减小,可达200 nm左右;复合物的Zeta 电位随N/P比增大而增强;与单独鱼精蛋白复合物相比,细胞转染率有所降低.结论 MPEG-C-鱼精蛋白是一种制备工艺简单、对HSV-TK包裹能力高、细胞毒性小、具有一定价值的非病毒载体.
目的 研究非病毒載體MPEG-C-魚精蛋白繫統的製備方法、其對不同劑量魚精蛋白與單純皰疹病毒胸苷激酶(HSV-TK)的結閤能力以及對HeLa細胞的影響.方法 將一定量的MPEG-C-和不同量的魚精蛋白混閤後與DNA室溫孵育,得到MPEG-C-魚精蛋白/DNA複閤物;用瓊脂糖電泳實驗測定不同N/P比形成複閤物時對HSV-TK的阻滯情況; 用結閤沉澱試驗比較不同量魚精蛋白對包裹HSV-TK的能力的影響;MTT 法檢測MPEG-C-魚精蛋白對HeLa 宮頸癌細胞的毒性作用及其複閤物對HeLa細胞的轉染率.結果 MPEG-C-魚精蛋白複閤物包裹HSV-TK的能力隨N/P比增大而增彊;粒徑隨N/P比增大而減小,可達200 nm左右;複閤物的Zeta 電位隨N/P比增大而增彊;與單獨魚精蛋白複閤物相比,細胞轉染率有所降低.結論 MPEG-C-魚精蛋白是一種製備工藝簡單、對HSV-TK包裹能力高、細胞毒性小、具有一定價值的非病毒載體.
목적 연구비병독재체MPEG-C-어정단백계통적제비방법、기대불동제량어정단백여단순포진병독흉감격매(HSV-TK)적결합능력이급대HeLa세포적영향.방법 장일정량적MPEG-C-화불동량적어정단백혼합후여DNA실온부육,득도MPEG-C-어정단백/DNA복합물;용경지당전영실험측정불동N/P비형성복합물시대HSV-TK적조체정황; 용결합침정시험비교불동량어정단백대포과HSV-TK적능력적영향;MTT 법검측MPEG-C-어정단백대HeLa 궁경암세포적독성작용급기복합물대HeLa세포적전염솔.결과 MPEG-C-어정단백복합물포과HSV-TK적능력수N/P비증대이증강;립경수N/P비증대이감소,가체200 nm좌우;복합물적Zeta 전위수N/P비증대이증강;여단독어정단백복합물상비,세포전염솔유소강저.결론 MPEG-C-어정단백시일충제비공예간단、대HSV-TK포과능력고、세포독성소、구유일정개치적비병독재체.