中国糖尿病杂志
中國糖尿病雜誌
중국당뇨병잡지
CHINESE JOURNAL OF DIABETES
2014年
3期
268-272
,共5页
刘丽秋%傅文%徐晶%宋起%周丽敏
劉麗鞦%傅文%徐晶%宋起%週麗敏
류려추%부문%서정%송기%주려민
瘦素%肾小管%上皮细胞%上皮细胞-间充质转分化%转化生长因子-β1
瘦素%腎小管%上皮細胞%上皮細胞-間充質轉分化%轉化生長因子-β1
수소%신소관%상피세포%상피세포-간충질전분화%전화생장인자-β1
Leptin%Kidney tubules%Epithelial cells%Epithelial-mesenchymal transition%Transforming growth factor beta 1
目的 观察瘦素(LP)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2)转分化及与转化生长因子-β1(TGF-β1)表达的影响,探讨其诱导转分化的机制.方法 不同浓度LP(10、50、100 ng/ml)刺激体外培养的HK-2细胞,以及LP作用不同时间(24、48、72 h)进行分组,倒置显微镜下观察细胞形态学变化;RT-PCR法和Western blot法检测细胞α-SMA、E-cadherin、TGF-β1、FN的表达水平;ELISA法检测上清中TGF-β1蛋白表达量.抗TGF-β1抗体中和实验分析LP对HK-2细胞转分化及与TGE-β1的关系.结果 (1)LP可使HK-2细胞逐渐由椭圆形变成长梭形,类似肌成纤维细胞的形态;(2)LP可下调E-cadherin的表达,同时上调α-SMA、TGF-β1的表达,其作用呈一定的剂量及时间依赖性;(3)抗TGF-β1抗体能够逆转LP诱导的转分化作用.结论 LP通过诱导HK-2细胞发生转分化,参与肾间质纤维化的发生发展,其作用机制与上调TGF-β1的表达有关.
目的 觀察瘦素(LP)對人近耑腎小管上皮細胞(HK-2)轉分化及與轉化生長因子-β1(TGF-β1)錶達的影響,探討其誘導轉分化的機製.方法 不同濃度LP(10、50、100 ng/ml)刺激體外培養的HK-2細胞,以及LP作用不同時間(24、48、72 h)進行分組,倒置顯微鏡下觀察細胞形態學變化;RT-PCR法和Western blot法檢測細胞α-SMA、E-cadherin、TGF-β1、FN的錶達水平;ELISA法檢測上清中TGF-β1蛋白錶達量.抗TGF-β1抗體中和實驗分析LP對HK-2細胞轉分化及與TGE-β1的關繫.結果 (1)LP可使HK-2細胞逐漸由橢圓形變成長梭形,類似肌成纖維細胞的形態;(2)LP可下調E-cadherin的錶達,同時上調α-SMA、TGF-β1的錶達,其作用呈一定的劑量及時間依賴性;(3)抗TGF-β1抗體能夠逆轉LP誘導的轉分化作用.結論 LP通過誘導HK-2細胞髮生轉分化,參與腎間質纖維化的髮生髮展,其作用機製與上調TGF-β1的錶達有關.
목적 관찰수소(LP)대인근단신소관상피세포(HK-2)전분화급여전화생장인자-β1(TGF-β1)표체적영향,탐토기유도전분화적궤제.방법 불동농도LP(10、50、100 ng/ml)자격체외배양적HK-2세포,이급LP작용불동시간(24、48、72 h)진행분조,도치현미경하관찰세포형태학변화;RT-PCR법화Western blot법검측세포α-SMA、E-cadherin、TGF-β1、FN적표체수평;ELISA법검측상청중TGF-β1단백표체량.항TGF-β1항체중화실험분석LP대HK-2세포전분화급여TGE-β1적관계.결과 (1)LP가사HK-2세포축점유타원형변성장사형,유사기성섬유세포적형태;(2)LP가하조E-cadherin적표체,동시상조α-SMA、TGF-β1적표체,기작용정일정적제량급시간의뢰성;(3)항TGF-β1항체능구역전LP유도적전분화작용.결론 LP통과유도HK-2세포발생전분화,삼여신간질섬유화적발생발전,기작용궤제여상조TGF-β1적표체유관.
