华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2013年
6期
685-688
,共4页
马俊磊%曾怡%张冬梅%姜松%李幸%戴晓敏%汪晶%宫念樵
馬俊磊%曾怡%張鼕梅%薑鬆%李倖%戴曉敏%汪晶%宮唸樵
마준뢰%증이%장동매%강송%리행%대효민%왕정%궁념초
胰岛%分离%纯化%小鼠%胰岛移植
胰島%分離%純化%小鼠%胰島移植
이도%분리%순화%소서%이도이식
islet%isolation%purification%mouse%islet transplantation
目的 改进小鼠胰岛的分离、纯化及移植方法.方法 基于传统小鼠胰岛移植模型,优化胶原酶消化液配方,标准化胰腺组织的消化过程,改用Histopaque 1077作为纯化胰岛的离心介质,改进胰岛制备物输送至肾包膜下的方法;相差显微镜下观察所获胰岛的形态,用双硫腙(DTZ)对胰岛进行特异性染色并计算胰岛产量及纯度;采用吖啶橙-碘化丙啶(AO-PI)染色法观察胰岛活性;制备糖尿病小鼠模型,设计胰岛移植组(10只)及假手术对照组(10只),检验胰岛移植物治疗糖尿病的效果.结果 健康胰岛有完整包膜,DTZ染色后呈猩红色,平均每只小鼠可收获(200±30)个胰岛团,终纯度(90±5)％;荧光显微镜下,AO-PI染色后,正常胰岛显示绿色,死亡胰岛显示红色,胰岛存活率为(93±3)％;糖尿病小鼠接受同系胰岛移植后,90％的小鼠逆转糖尿病,对照组小鼠的血糖无改善.结论 成功改进胰岛移植模型,简化和标准化小鼠胰岛的分离、纯化及移植过程,有助于该模型成为胰岛移植研究的常规方法.
目的 改進小鼠胰島的分離、純化及移植方法.方法 基于傳統小鼠胰島移植模型,優化膠原酶消化液配方,標準化胰腺組織的消化過程,改用Histopaque 1077作為純化胰島的離心介質,改進胰島製備物輸送至腎包膜下的方法;相差顯微鏡下觀察所穫胰島的形態,用雙硫腙(DTZ)對胰島進行特異性染色併計算胰島產量及純度;採用吖啶橙-碘化丙啶(AO-PI)染色法觀察胰島活性;製備糖尿病小鼠模型,設計胰島移植組(10隻)及假手術對照組(10隻),檢驗胰島移植物治療糖尿病的效果.結果 健康胰島有完整包膜,DTZ染色後呈猩紅色,平均每隻小鼠可收穫(200±30)箇胰島糰,終純度(90±5)％;熒光顯微鏡下,AO-PI染色後,正常胰島顯示綠色,死亡胰島顯示紅色,胰島存活率為(93±3)％;糖尿病小鼠接受同繫胰島移植後,90％的小鼠逆轉糖尿病,對照組小鼠的血糖無改善.結論 成功改進胰島移植模型,簡化和標準化小鼠胰島的分離、純化及移植過程,有助于該模型成為胰島移植研究的常規方法.
목적 개진소서이도적분리、순화급이식방법.방법 기우전통소서이도이식모형,우화효원매소화액배방,표준화이선조직적소화과정,개용Histopaque 1077작위순화이도적리심개질,개진이도제비물수송지신포막하적방법;상차현미경하관찰소획이도적형태,용쌍류종(DTZ)대이도진행특이성염색병계산이도산량급순도;채용아정등-전화병정(AO-PI)염색법관찰이도활성;제비당뇨병소서모형,설계이도이식조(10지)급가수술대조조(10지),검험이도이식물치료당뇨병적효과.결과 건강이도유완정포막,DTZ염색후정성홍색,평균매지소서가수획(200±30)개이도단,종순도(90±5)％;형광현미경하,AO-PI염색후,정상이도현시록색,사망이도현시홍색,이도존활솔위(93±3)％;당뇨병소서접수동계이도이식후,90％적소서역전당뇨병,대조조소서적혈당무개선.결론 성공개진이도이식모형,간화화표준화소서이도적분리、순화급이식과정,유조우해모형성위이도이식연구적상규방법.
