农业生物技术学报
農業生物技術學報
농업생물기술학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL BIOTECHNOLOGY
2013年
12期
1465-1472
,共8页
孙娜%周催%王翠燕%孙璐%车会莲
孫娜%週催%王翠燕%孫璐%車會蓮
손나%주최%왕취연%손로%차회련
RBL-2H3细胞%RBL-1细胞%食品过敏原%致敏活性%脱颗粒
RBL-2H3細胞%RBL-1細胞%食品過敏原%緻敏活性%脫顆粒
RBL-2H3세포%RBL-1세포%식품과민원%치민활성%탈과립
RBL-2H3 cell%RBL-1 cell%Food allergen%Allergenicity%Degranulation
目前广泛通过检测过敏患者血清中过敏原特异性IgE含量来进行过敏诊断,然而有研究显示,过敏患者血清中IgE水平与临床症状并无直接的关系.本研究通过比较大鼠(Rattus norvegicus)嗜碱性白血病粒细胞系(rat basophilleukemia,RBL) RBL-2H3和RBL-1细胞与致敏小鼠(Mus musculus)血清中免疫球蛋白(IgE)抗体的结合能力以及脱颗粒能力,建立一种用于评价食品蛋白潜在致敏性的细胞免疫学评价方法.采用3种具有不同潜在致敏性的食品蛋白(大豆球蛋白(Gly)、卵清白蛋白(OVA)和马铃薯酸性磷酸酶(PAP)),对3~4周龄雌性Balb/c小鼠进行经口致敏5次,获取致敏血清用于流式细胞术对RBL-2H3和RBL-1细胞结合能力的分析以及体外介质释放实验.同时测定Balb/c小鼠的系统性过敏反应,探究RBL细胞脱颗粒反应与系统性过敏反应的关系.结果显示,小鼠血清IgE与RBL-2H3细胞的结合能力显著高于RBL-1细胞(P<0.05).RBL-2H3细胞表现出较好的脱颗粒反应,显著高于RBL-1细胞(P<0.05),而RBL-1细胞表现出较低的脱颗粒反应.另外,RBL-2H3细胞介质释放实验检测灵敏度高,只需10~100ng/mL的过敏原即可诱发细胞产生最强的脱颗粒反应,能够检测到食品中微量的致敏蛋白,检测特异性高;用抗OVA的小鼠血清致敏细胞,Gly诱导后,细胞未发生脱颗粒,能够区分Gly、OVA和PAP 3种不同致敏性的食品蛋白,与系统性过敏反应结果一致,真正反映食品蛋白诱发IgE介导的过敏反应的能力.研究结果提示,RBL-2H3细胞模型可以作为一种用于检测食品蛋白潜在致敏活性的有效方法.研究结果为建立评价新型食物蛋白潜在致敏性的细胞模型提供了一定的科学依据.
目前廣汎通過檢測過敏患者血清中過敏原特異性IgE含量來進行過敏診斷,然而有研究顯示,過敏患者血清中IgE水平與臨床癥狀併無直接的關繫.本研究通過比較大鼠(Rattus norvegicus)嗜堿性白血病粒細胞繫(rat basophilleukemia,RBL) RBL-2H3和RBL-1細胞與緻敏小鼠(Mus musculus)血清中免疫毬蛋白(IgE)抗體的結閤能力以及脫顆粒能力,建立一種用于評價食品蛋白潛在緻敏性的細胞免疫學評價方法.採用3種具有不同潛在緻敏性的食品蛋白(大豆毬蛋白(Gly)、卵清白蛋白(OVA)和馬鈴藷痠性燐痠酶(PAP)),對3~4週齡雌性Balb/c小鼠進行經口緻敏5次,穫取緻敏血清用于流式細胞術對RBL-2H3和RBL-1細胞結閤能力的分析以及體外介質釋放實驗.同時測定Balb/c小鼠的繫統性過敏反應,探究RBL細胞脫顆粒反應與繫統性過敏反應的關繫.結果顯示,小鼠血清IgE與RBL-2H3細胞的結閤能力顯著高于RBL-1細胞(P<0.05).RBL-2H3細胞錶現齣較好的脫顆粒反應,顯著高于RBL-1細胞(P<0.05),而RBL-1細胞錶現齣較低的脫顆粒反應.另外,RBL-2H3細胞介質釋放實驗檢測靈敏度高,隻需10~100ng/mL的過敏原即可誘髮細胞產生最彊的脫顆粒反應,能夠檢測到食品中微量的緻敏蛋白,檢測特異性高;用抗OVA的小鼠血清緻敏細胞,Gly誘導後,細胞未髮生脫顆粒,能夠區分Gly、OVA和PAP 3種不同緻敏性的食品蛋白,與繫統性過敏反應結果一緻,真正反映食品蛋白誘髮IgE介導的過敏反應的能力.研究結果提示,RBL-2H3細胞模型可以作為一種用于檢測食品蛋白潛在緻敏活性的有效方法.研究結果為建立評價新型食物蛋白潛在緻敏性的細胞模型提供瞭一定的科學依據.
목전엄범통과검측과민환자혈청중과민원특이성IgE함량래진행과민진단,연이유연구현시,과민환자혈청중IgE수평여림상증상병무직접적관계.본연구통과비교대서(Rattus norvegicus)기감성백혈병립세포계(rat basophilleukemia,RBL) RBL-2H3화RBL-1세포여치민소서(Mus musculus)혈청중면역구단백(IgE)항체적결합능력이급탈과립능력,건립일충용우평개식품단백잠재치민성적세포면역학평개방법.채용3충구유불동잠재치민성적식품단백(대두구단백(Gly)、란청백단백(OVA)화마령서산성린산매(PAP)),대3~4주령자성Balb/c소서진행경구치민5차,획취치민혈청용우류식세포술대RBL-2H3화RBL-1세포결합능력적분석이급체외개질석방실험.동시측정Balb/c소서적계통성과민반응,탐구RBL세포탈과립반응여계통성과민반응적관계.결과현시,소서혈청IgE여RBL-2H3세포적결합능력현저고우RBL-1세포(P<0.05).RBL-2H3세포표현출교호적탈과립반응,현저고우RBL-1세포(P<0.05),이RBL-1세포표현출교저적탈과립반응.령외,RBL-2H3세포개질석방실험검측령민도고,지수10~100ng/mL적과민원즉가유발세포산생최강적탈과립반응,능구검측도식품중미량적치민단백,검측특이성고;용항OVA적소서혈청치민세포,Gly유도후,세포미발생탈과립,능구구분Gly、OVA화PAP 3충불동치민성적식품단백,여계통성과민반응결과일치,진정반영식품단백유발IgE개도적과민반응적능력.연구결과제시,RBL-2H3세포모형가이작위일충용우검측식품단백잠재치민활성적유효방법.연구결과위건립평개신형식물단백잠재치민성적세포모형제공료일정적과학의거.