CAJ | 학술논문

目的:人类精子所含RNA极少量,且由于精子中圆形细胞存在,使得分离精子RNA具有一定的挑战性.本研究旨在优化人类精子RNA的提取方案.方法:利用40％的单层梯度液及精子洗涤液纯化精子,使用TRIzol试剂和RNeasy Mini Kit提取RNA,反转录精子RNA,以eDNA为模板扩增PRM2、c-Kit、CD45、CDH1基因来确定所提精子RNA中是否存在基因组DNA或体细胞RNA的污染.结果:利用3倍体积的40％单层梯度液及精子洗涤液可以完全去除精液中体细胞的污染,利用TRIzol试剂提取RNA比RNeasy Mini Kit更有效.结论:人类精子中含有微量RNA,此方法既经济又有效,可以提取高质量的精子RNA,为人类男性生殖的功能基因组研究奠定基础.
목적:인류정자소함RNA겁소량,차유우정자중원형세포존재,사득분리정자RNA구유일정적도전성.본연구지재우화인류정자RNA적제취방안.방법:이용40％적단층제도액급정자세조액순화정자,사용TRIzol시제화RNeasy Mini Kit제취RNA,반전록정자RNA,이eDNA위모판확증PRM2、c-Kit、CD45、CDH1기인래학정소제정자RNA중시부존재기인조DNA혹체세포RNA적오염.결과:이용3배체적적40％단층제도액급정자세조액가이완전거제정액중체세포적오염,이용TRIzol시제제취RNA비RNeasy Mini Kit경유효.결론:인류정자중함유미량RNA,차방법기경제우유효,가이제취고질량적정자RNA,위인류남성생식적공능기인조연구전정기출.