CAJ | 학술논문

目的:筛选一种抗冻剂配方,为建立深低温高活性保存的羊膜库提供依据.方法:选取12只健康剖宫产产妇羊膜,根据预处理抗冻剂的不同随机分为4组:A组(空白对照组),B组(DMEM/甘油组),C组(DMEM/甘油/DMSO组),D组(DMEM/甘油/ DMSO/海藻糖组).冷冻保存后第1,3个月取羊膜行HE与台盼蓝染色,分别观察羊膜结构,计算羊膜上皮细胞死亡率,并与新鲜羊膜(E组)比较.结果:E组:上皮细胞呈柱状、排列整齐紧密,细胞膜清晰,细胞核圆润蓝染,基底膜连续,细胞死亡率为(6.95±1.95)%.A组:保存1,3个月羊膜上皮层结构完整性均破坏、核固缩呈深蓝染,基底膜渐变为模糊不清.细胞死亡率分别为(39.96±5.84)%,(81.50±4.50)%,两组比较差异有统计学意义(t=13.796,P<0.05).B组:保存1,3个月细胞变形,核固缩加剧,基底膜渐变为不连续.细胞死亡率分别为(21.61±6.65)%,(36.76±10.72)%,两组比较差异有统计学意义(t=2.940,P<0.05).C组:保存1个月后类似新鲜羊膜,保存3个月后羊膜上皮细胞扁平,细胞核深染固缩,基底膜较完整.细胞死亡率分别为(14.08±3.21)%,(29.68±8.19)%,两组比较差异无统计学意义(t=4.344,P>0.05).D组保存1,3个月形态结构接近新鲜羊膜,死亡率分别为(8.51±1.75)%,(12.70±5.70)%,两组比较差异无统计学意义(t=1.722,P>0.05).保存1个月的A、B、C组死亡率与D、E组比较均有统计学差异(P<0.05),D、E组间比较差异无统计学意义(P>0.05);保存3个月的A、B、C、D、E各组间比较均有统计学差异(P<0.05),但D组存活率仍然达到87.3%.结论:DMEM/甘油/ DMSO/海藻糖可作为新型抗冻剂用于深低温高活性保存羊膜.
목적:사선일충항동제배방,위건립심저온고활성보존적양막고제공의거.방법:선취12지건강부궁산산부양막,근거예처리항동제적불동수궤분위4조:A조(공백대조조),B조(DMEM/감유조),C조(DMEM/감유/DMSO조),D조(DMEM/감유/ DMSO/해조당조).냉동보존후제1,3개월취양막행HE여태반람염색,분별관찰양막결구,계산양막상피세포사망솔,병여신선양막(E조)비교.결과:E조:상피세포정주상、배렬정제긴밀,세포막청석,세포핵원윤람염,기저막련속,세포사망솔위(6.95±1.95)%.A조:보존1,3개월양막상피층결구완정성균파배、핵고축정심람염,기저막점변위모호불청.세포사망솔분별위(39.96±5.84)%,(81.50±4.50)%,량조비교차이유통계학의의(t=13.796,P<0.05).B조:보존1,3개월세포변형,핵고축가극,기저막점변위불련속.세포사망솔분별위(21.61±6.65)%,(36.76±10.72)%,량조비교차이유통계학의의(t=2.940,P<0.05).C조:보존1개월후유사신선양막,보존3개월후양막상피세포편평,세포핵심염고축,기저막교완정.세포사망솔분별위(14.08±3.21)%,(29.68±8.19)%,량조비교차이무통계학의의(t=4.344,P>0.05).D조보존1,3개월형태결구접근신선양막,사망솔분별위(8.51±1.75)%,(12.70±5.70)%,량조비교차이무통계학의의(t=1.722,P>0.05).보존1개월적A、B、C조사망솔여D、E조비교균유통계학차이(P<0.05),D、E조간비교차이무통계학의의(P>0.05);보존3개월적A、B、C、D、E각조간비교균유통계학차이(P<0.05),단D조존활솔잉연체도87.3%.결론:DMEM/감유/ DMSO/해조당가작위신형항동제용우심저온고활성보존양막.