CAJ | 학술논문

目的:探讨耐顺铂卵巢癌SKOV3/DDPⅡ细胞对于顺铂作用后其细胞周期、凋亡、增殖及铂类耐药相关基因ARHGDIB和CCND1表达量的变化.方法:采用流式细胞术检测不同浓度和时间顺铂作用后SKOV3/DDPⅡ细胞周期和凋亡率的变化,并与标记GFP的上皮性卵巢癌细胞株SKOV3-GFP(敏感株)相比较;通过3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)法检测不同浓度和时间顺铂作用后细胞增殖的变化;实时荧光定量PCR(QRT-PCR)检测裸鼠体内瘤块耐药基因CCND1和ARHGDIB基因的表达情况.结果:半抑制浓度的顺铂作用48 h后,SKOV3-GFP和SKOV3/DDPⅡ两株细胞分布于G0/G1期的比例相对于无顺铂处理组明显下降(P<0.01,P<0.05),SKOV3/DDPⅡ细胞分布于G2/M期的比例则相对于无顺铂处理组明显升高(P<0.01);而顺铂作用48 h内SKOV3-GFP和SKOV3/DDPⅡ两株细胞凋亡率随时间和浓度的增大而增大; 以9.9,19.8,29.7 μmol/L浓度的顺铂处理6 d以后,SKOV3/DDPⅡ的增殖抑制得到解除,并继续生长,而SKOV3-GFP细胞则随顺铂作用时间延长增殖持续受到抑制.顺铂作用体内移植瘤5次后,CCND1在SKOV3/DDPⅡ-5的相对表达比SKOV3/DDPⅡ-0 增高92.98倍,作用第8次后,ARHGDIB在SKOV3/DDPⅡ-8的相对表达比SKOV3/DDPⅡ-0增高2.51倍.结论:具有耐药表型的卵巢上皮癌细胞在顺铂作用下降低分布于G0/G1期细胞数使细胞生长受到一定程度的抑制,但在顺铂刺激后肿瘤细胞过度表达CCND1基因使细胞顺利通过G1/S检查点促进肿瘤细胞增殖,同时上调表达ARHGDIB基因抵抗顺铂诱导的肿瘤细胞凋亡.
목적:탐토내순박란소암SKOV3/DDPⅡ세포대우순박작용후기세포주기、조망、증식급박류내약상관기인ARHGDIB화CCND1표체량적변화.방법:채용류식세포술검측불동농도화시간순박작용후SKOV3/DDPⅡ세포주기화조망솔적변화,병여표기GFP적상피성란소암세포주SKOV3-GFP(민감주)상비교;통과3-(4,5-이갑기새서-2)-2,5-이분기사담서추염(MTT)법검측불동농도화시간순박작용후세포증식적변화;실시형광정량PCR(QRT-PCR)검측라서체내류괴내약기인CCND1화ARHGDIB기인적표체정황.결과:반억제농도적순박작용48 h후,SKOV3-GFP화SKOV3/DDPⅡ량주세포분포우G0/G1기적비례상대우무순박처리조명현하강(P<0.01,P<0.05),SKOV3/DDPⅡ세포분포우G2/M기적비례칙상대우무순박처리조명현승고(P<0.01);이순박작용48 h내SKOV3-GFP화SKOV3/DDPⅡ량주세포조망솔수시간화농도적증대이증대; 이9.9,19.8,29.7 μmol/L농도적순박처리6 d이후,SKOV3/DDPⅡ적증식억제득도해제,병계속생장,이SKOV3-GFP세포칙수순박작용시간연장증식지속수도억제.순박작용체내이식류5차후,CCND1재SKOV3/DDPⅡ-5적상대표체비SKOV3/DDPⅡ-0 증고92.98배,작용제8차후,ARHGDIB재SKOV3/DDPⅡ-8적상대표체비SKOV3/DDPⅡ-0증고2.51배.결론:구유내약표형적란소상피암세포재순박작용하강저분포우G0/G1기세포수사세포생장수도일정정도적억제,단재순박자격후종류세포과도표체CCND1기인사세포순리통과G1/S검사점촉진종류세포증식,동시상조표체ARHGDIB기인저항순박유도적종류세포조망.