华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2013年
2期
187-191
,共5页
高晶%石慧%裴晗%万幸%胡维琨%李涛%杜皓%李斌
高晶%石慧%裴晗%萬倖%鬍維琨%李濤%杜皓%李斌
고정%석혜%배함%만행%호유곤%리도%두호%리빈
Leber遗传性视神经病变%ND4基因%基因转染%免疫抑制
Leber遺傳性視神經病變%ND4基因%基因轉染%免疫抑製
Leber유전성시신경병변%ND4기인%기인전염%면역억제
目的 玻璃体腔注射重组ND4基因的腺相关病毒血清型2(Adenovirus associated virus 2 -NADH dehydrogenase subunit 4,AAV2-ND4)是Leber遗传性视神经病变(Leber hereditary optic neuropathy,LHON)的基因治疗方法,观察基因治疗后不同免疫抑制方案组全身免疫抑制效果及ND4基因表达情况.方法 各实验组(A~D组)均单次玻璃体腔注射4 μL AAV2-ND4,注射后灌胃予以口服药物28 d,A组不予以免疫抑制治疗,B组口服环孢霉素A[起始剂量10 mg/(kg·d),14 d后减半],C组口服强的松[起始剂量5 mg/(kg·d),14 d后减半],D组玻璃体腔同时注射曲安奈德,并口服强的松(剂量同C组),对照组(E组)单次玻璃体腔注射4 μL磷酸缓冲盐溶液.分别于注射AAV2-ND4后3、7、28、56、84 d后检测血清中AAV2和ND4的抗体含量,同时于第84 d观察鼠视网膜上ND4的表达.结果 A~D各组抗ND4基因抗体浓度在第56天时均明显增加,以A、C组为显著;第84天时,除D组外各组抗体浓度均出现不同程度下降.A~D各组抗AAV2抗体浓度在第28天时明显增加,以A、C组为显著;第56天时除B组外各组抗体浓度均出现下降.实验各组的视网膜神经节细胞层在注射第84天仍有明显ND4表达.结论 免疫反应主要集中在玻璃体腔注射AAV2-ND4后56 d内;各个方案的免疫抑制效果均不理想;不同免疫抑制治疗方案对ND4的表达效率无明显影响.
目的 玻璃體腔註射重組ND4基因的腺相關病毒血清型2(Adenovirus associated virus 2 -NADH dehydrogenase subunit 4,AAV2-ND4)是Leber遺傳性視神經病變(Leber hereditary optic neuropathy,LHON)的基因治療方法,觀察基因治療後不同免疫抑製方案組全身免疫抑製效果及ND4基因錶達情況.方法 各實驗組(A~D組)均單次玻璃體腔註射4 μL AAV2-ND4,註射後灌胃予以口服藥物28 d,A組不予以免疫抑製治療,B組口服環孢黴素A[起始劑量10 mg/(kg·d),14 d後減半],C組口服彊的鬆[起始劑量5 mg/(kg·d),14 d後減半],D組玻璃體腔同時註射麯安奈德,併口服彊的鬆(劑量同C組),對照組(E組)單次玻璃體腔註射4 μL燐痠緩遲鹽溶液.分彆于註射AAV2-ND4後3、7、28、56、84 d後檢測血清中AAV2和ND4的抗體含量,同時于第84 d觀察鼠視網膜上ND4的錶達.結果 A~D各組抗ND4基因抗體濃度在第56天時均明顯增加,以A、C組為顯著;第84天時,除D組外各組抗體濃度均齣現不同程度下降.A~D各組抗AAV2抗體濃度在第28天時明顯增加,以A、C組為顯著;第56天時除B組外各組抗體濃度均齣現下降.實驗各組的視網膜神經節細胞層在註射第84天仍有明顯ND4錶達.結論 免疫反應主要集中在玻璃體腔註射AAV2-ND4後56 d內;各箇方案的免疫抑製效果均不理想;不同免疫抑製治療方案對ND4的錶達效率無明顯影響.
목적 파리체강주사중조ND4기인적선상관병독혈청형2(Adenovirus associated virus 2 -NADH dehydrogenase subunit 4,AAV2-ND4)시Leber유전성시신경병변(Leber hereditary optic neuropathy,LHON)적기인치료방법,관찰기인치료후불동면역억제방안조전신면역억제효과급ND4기인표체정황.방법 각실험조(A~D조)균단차파리체강주사4 μL AAV2-ND4,주사후관위여이구복약물28 d,A조불여이면역억제치료,B조구복배포매소A[기시제량10 mg/(kg·d),14 d후감반],C조구복강적송[기시제량5 mg/(kg·d),14 d후감반],D조파리체강동시주사곡안내덕,병구복강적송(제량동C조),대조조(E조)단차파리체강주사4 μL린산완충염용액.분별우주사AAV2-ND4후3、7、28、56、84 d후검측혈청중AAV2화ND4적항체함량,동시우제84 d관찰서시망막상ND4적표체.결과 A~D각조항ND4기인항체농도재제56천시균명현증가,이A、C조위현저;제84천시,제D조외각조항체농도균출현불동정도하강.A~D각조항AAV2항체농도재제28천시명현증가,이A、C조위현저;제56천시제B조외각조항체농도균출현하강.실험각조적시망막신경절세포층재주사제84천잉유명현ND4표체.결론 면역반응주요집중재파리체강주사AAV2-ND4후56 d내;각개방안적면역억제효과균불이상;불동면역억제치료방안대ND4적표체효솔무명현영향.
