华中科技大学学报（医学版）
華中科技大學學報（醫學版）
화중과기대학학보（의학판）
ACTA UNIVERSITATIS MEDICINAE TONGJI
2013年
2期
143-147
,共5页
曹旭%肖海兵%杨燕%常飞%张临洪
曹旭%肖海兵%楊燕%常飛%張臨洪
조욱%초해병%양연%상비%장림홍
核因子红系2相关因子2%莱菔硫烷%1-甲基-4-苯基吡啶离子%PC12细胞%氧化应激%Akt
覈因子紅繫2相關因子2%萊菔硫烷%1-甲基-4-苯基吡啶離子%PC12細胞%氧化應激%Akt
핵인자홍계2상관인자2%래복류완%1-갑기-4-분기필정리자%PC12세포%양화응격%Akt
目的 探讨激活核因子红系2相关因子2(nuclear factor erythroid-derived 2-related factor 2,Nrf2)对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导PC12细胞氧化应激损伤的保护作用及其机制.方法 以MPP+损伤PC12细胞作为帕金森病(PD)细胞模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡率,双氯荧光黄乙酸乙酯(DCF-DA)染色检测细胞内活性氧簇(ROS)的生成量,罗丹明123(Rh123)染色检测细胞线粒体膜电位(ΔΨm),免疫印迹法检测磷酸化的蛋白激酶B(pAkt)表达水平,评价Nrf2激动剂莱菔硫烷(SFP)对该损伤模型的影响并探讨其相关机制.结果 ①500 μmol/L的MPP+可以导致PC12细胞的存活率下降,凋亡率增加,0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 μmol/L浓度的SFP可以使PC12细胞的存活率增加、凋亡率降低,并在5.0 μmol/L时达到最大保护效果;②MPP+导致PC12细胞ROS生成增加、ΔΨm降低,SFP可以减轻该氧化应激损伤;③SFP增加Akt磷酸化水平,该效应及其抗氧化损伤作用可被PI3K抑制剂LY294002所拮抗.结论 Nrf2活化剂SFP能抑制MPP+对PC12细胞的氧化应激损伤,其机制是通过PI3K/Akt通路实现的.
目的 探討激活覈因子紅繫2相關因子2(nuclear factor erythroid-derived 2-related factor 2,Nrf2)對1-甲基-4-苯基吡啶離子(MPP+)誘導PC12細胞氧化應激損傷的保護作用及其機製.方法 以MPP+損傷PC12細胞作為帕金森病(PD)細胞模型,採用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測細胞存活率,流式細胞術檢測細胞凋亡率,雙氯熒光黃乙痠乙酯(DCF-DA)染色檢測細胞內活性氧簇(ROS)的生成量,囉丹明123(Rh123)染色檢測細胞線粒體膜電位(ΔΨm),免疫印跡法檢測燐痠化的蛋白激酶B(pAkt)錶達水平,評價Nrf2激動劑萊菔硫烷(SFP)對該損傷模型的影響併探討其相關機製.結果 ①500 μmol/L的MPP+可以導緻PC12細胞的存活率下降,凋亡率增加,0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 μmol/L濃度的SFP可以使PC12細胞的存活率增加、凋亡率降低,併在5.0 μmol/L時達到最大保護效果;②MPP+導緻PC12細胞ROS生成增加、ΔΨm降低,SFP可以減輕該氧化應激損傷;③SFP增加Akt燐痠化水平,該效應及其抗氧化損傷作用可被PI3K抑製劑LY294002所拮抗.結論 Nrf2活化劑SFP能抑製MPP+對PC12細胞的氧化應激損傷,其機製是通過PI3K/Akt通路實現的.
목적 탐토격활핵인자홍계2상관인자2(nuclear factor erythroid-derived 2-related factor 2,Nrf2)대1-갑기-4-분기필정리자(MPP+)유도PC12세포양화응격손상적보호작용급기궤제.방법 이MPP+손상PC12세포작위파금삼병(PD)세포모형,채용사갑기우담서염(MTT)법검측세포존활솔,류식세포술검측세포조망솔,쌍록형광황을산을지(DCF-DA)염색검측세포내활성양족(ROS)적생성량,라단명123(Rh123)염색검측세포선립체막전위(ΔΨm),면역인적법검측린산화적단백격매B(pAkt)표체수평,평개Nrf2격동제래복류완(SFP)대해손상모형적영향병탐토기상관궤제.결과 ①500 μmol/L적MPP+가이도치PC12세포적존활솔하강,조망솔증가,0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 μmol/L농도적SFP가이사PC12세포적존활솔증가、조망솔강저,병재5.0 μmol/L시체도최대보호효과;②MPP+도치PC12세포ROS생성증가、ΔΨm강저,SFP가이감경해양화응격손상;③SFP증가Akt린산화수평,해효응급기항양화손상작용가피PI3K억제제LY294002소길항.결론 Nrf2활화제SFP능억제MPP+대PC12세포적양화응격손상,기궤제시통과PI3K/Akt통로실현적.
