郑州大学学报(医学版)
鄭州大學學報(醫學版)
정주대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERISTY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
2期
163-167
,共5页
王娜%冷弘%李敏%臧文巧%王媛媛
王娜%冷弘%李敏%臧文巧%王媛媛
왕나%랭홍%리민%장문교%왕원원
Cyclin E%RNA干扰%EC9706细胞
Cyclin E%RNA榦擾%EC9706細胞
Cyclin E%RNA간우%EC9706세포
目的:构建Cyclin E基因干扰载体,转染食管癌EC9706细胞,观察其对Cyclin E基因表达的影响.方法:设计、合成靶向Cyclin E基因siRNA,退火成双链后与pRNAT-CMV3.1/Neo载体连接.转染EC9706细胞后,倒置荧光显微镜下观察细胞转染效果,RT-PCR、Western-blot分别检测Cyclin E基因mRNA和蛋白表达水平.结果:构建的2个Cyclin E基因siRNA载体插入序列与所设计序列均一致;转染EC9706细胞后,干扰1组、干扰2组与无关siRNA对照组均产生绿色荧光,空白对照组无荧光产生.干扰1组、干扰2组与空白对照组和无关siRNA对照组Cyclin E mRNA相对表达量比较,差异有统计学意义(F=15.381,P=0.002),且干扰1组、干扰2组与空白对照组和无关siRNA对照组比较,Cyclin E mRNA相对表达量均降低(P均<0.05).结论:构建的靶向Cyclin E基因RNA干扰载体能有效抑制转染细胞Cyclin E基因的表达.
目的:構建Cyclin E基因榦擾載體,轉染食管癌EC9706細胞,觀察其對Cyclin E基因錶達的影響.方法:設計、閤成靶嚮Cyclin E基因siRNA,退火成雙鏈後與pRNAT-CMV3.1/Neo載體連接.轉染EC9706細胞後,倒置熒光顯微鏡下觀察細胞轉染效果,RT-PCR、Western-blot分彆檢測Cyclin E基因mRNA和蛋白錶達水平.結果:構建的2箇Cyclin E基因siRNA載體插入序列與所設計序列均一緻;轉染EC9706細胞後,榦擾1組、榦擾2組與無關siRNA對照組均產生綠色熒光,空白對照組無熒光產生.榦擾1組、榦擾2組與空白對照組和無關siRNA對照組Cyclin E mRNA相對錶達量比較,差異有統計學意義(F=15.381,P=0.002),且榦擾1組、榦擾2組與空白對照組和無關siRNA對照組比較,Cyclin E mRNA相對錶達量均降低(P均<0.05).結論:構建的靶嚮Cyclin E基因RNA榦擾載體能有效抑製轉染細胞Cyclin E基因的錶達.
목적:구건Cyclin E기인간우재체,전염식관암EC9706세포,관찰기대Cyclin E기인표체적영향.방법:설계、합성파향Cyclin E기인siRNA,퇴화성쌍련후여pRNAT-CMV3.1/Neo재체련접.전염EC9706세포후,도치형광현미경하관찰세포전염효과,RT-PCR、Western-blot분별검측Cyclin E기인mRNA화단백표체수평.결과:구건적2개Cyclin E기인siRNA재체삽입서렬여소설계서렬균일치;전염EC9706세포후,간우1조、간우2조여무관siRNA대조조균산생록색형광,공백대조조무형광산생.간우1조、간우2조여공백대조조화무관siRNA대조조Cyclin E mRNA상대표체량비교,차이유통계학의의(F=15.381,P=0.002),차간우1조、간우2조여공백대조조화무관siRNA대조조비교,Cyclin E mRNA상대표체량균강저(P균<0.05).결론:구건적파향Cyclin E기인RNA간우재체능유효억제전염세포Cyclin E기인적표체.
