临床与实验病理学杂志
臨床與實驗病理學雜誌
림상여실험병이학잡지
CHINESE JOURNAL OF CLINICAL AND EXPERIMENTAL PATHOLOGY
2013年
4期
356-360
,共5页
姚树哲%陈海燕%张晓莹%盛燕%周庚寅%张翠娟
姚樹哲%陳海燕%張曉瑩%盛燕%週庚寅%張翠娟
요수철%진해연%장효형%성연%주경인%장취연
肝细胞肿瘤%5-Aza-dC%TSA%甲基化%抑癌基因
肝細胞腫瘤%5-Aza-dC%TSA%甲基化%抑癌基因
간세포종류%5-Aza-dC%TSA%갑기화%억암기인
目的 探讨5-Aza-dC和TSA对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞中3-OST-2甲基化水平、基因表达以及对核转录因子UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,也称为ICBP90/NP95)表达的影响.方法 采用甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MSP)法检测药物作用前后HCC细胞株中3-OST-2甲基化的状态改变;采用实时荧光定量RT-PCR法检测3-OST-2和UHRF1 mRNA的表达变化;采用细胞爬片免疫组化法检测UHRF1蛋白表达.结果 3-OST-2在HCC细胞株中呈完全甲基化状态,5-Aza-dC或TSA均能部分逆转3-OST-2甲基化,其mRNA表达分别增加2.7倍和4.9倍,两种药物联合处理后,3-OST-2甲基化被完全逆转,其mRNA表达增加9.1倍.5-Aza-dC或TSA均能降低UHRF1 mRNA和蛋白的表达,TSA比5-Aza-dC疗效更好(P<0.01),两种药物联用具有协同作用(P<0.01).结论 启动子甲基化和组蛋白修饰共同导致3-OST-2基因表达降低.5-Aza-dC和TSA单独作用均能部分逆转3-OST-2甲基化,增加其mRNA表达,抑制核蛋白UHRF1表达可能是其中机制之一.
目的 探討5-Aza-dC和TSA對肝細胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)細胞中3-OST-2甲基化水平、基因錶達以及對覈轉錄因子UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,也稱為ICBP90/NP95)錶達的影響.方法 採用甲基化特異性PCR(methylation specific PCR,MSP)法檢測藥物作用前後HCC細胞株中3-OST-2甲基化的狀態改變;採用實時熒光定量RT-PCR法檢測3-OST-2和UHRF1 mRNA的錶達變化;採用細胞爬片免疫組化法檢測UHRF1蛋白錶達.結果 3-OST-2在HCC細胞株中呈完全甲基化狀態,5-Aza-dC或TSA均能部分逆轉3-OST-2甲基化,其mRNA錶達分彆增加2.7倍和4.9倍,兩種藥物聯閤處理後,3-OST-2甲基化被完全逆轉,其mRNA錶達增加9.1倍.5-Aza-dC或TSA均能降低UHRF1 mRNA和蛋白的錶達,TSA比5-Aza-dC療效更好(P<0.01),兩種藥物聯用具有協同作用(P<0.01).結論 啟動子甲基化和組蛋白脩飾共同導緻3-OST-2基因錶達降低.5-Aza-dC和TSA單獨作用均能部分逆轉3-OST-2甲基化,增加其mRNA錶達,抑製覈蛋白UHRF1錶達可能是其中機製之一.
목적 탐토5-Aza-dC화TSA대간세포암(hepatocellular carcinoma,HCC)세포중3-OST-2갑기화수평、기인표체이급대핵전록인자UHRF1(ubiquitin-like with PHD and ring finger domains 1,야칭위ICBP90/NP95)표체적영향.방법 채용갑기화특이성PCR(methylation specific PCR,MSP)법검측약물작용전후HCC세포주중3-OST-2갑기화적상태개변;채용실시형광정량RT-PCR법검측3-OST-2화UHRF1 mRNA적표체변화;채용세포파편면역조화법검측UHRF1단백표체.결과 3-OST-2재HCC세포주중정완전갑기화상태,5-Aza-dC혹TSA균능부분역전3-OST-2갑기화,기mRNA표체분별증가2.7배화4.9배,량충약물연합처리후,3-OST-2갑기화피완전역전,기mRNA표체증가9.1배.5-Aza-dC혹TSA균능강저UHRF1 mRNA화단백적표체,TSA비5-Aza-dC료효경호(P<0.01),량충약물련용구유협동작용(P<0.01).결론 계동자갑기화화조단백수식공동도치3-OST-2기인표체강저.5-Aza-dC화TSA단독작용균능부분역전3-OST-2갑기화,증가기mRNA표체,억제핵단백UHRF1표체가능시기중궤제지일.
