湖北农业科学
湖北農業科學
호북농업과학
2013年
3期
702-705
,共4页
高洁荣%何颖%邹泽红%艾云灿
高潔榮%何穎%鄒澤紅%艾雲燦
고길영%하영%추택홍%애운찬
苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)%Cry2Aa蛋白%表达%纯化
囌雲金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)%Cry2Aa蛋白%錶達%純化
소운금아포간균(Bacillus thuringiensis)%Cry2Aa단백%표체%순화
Bacillus thuringiensis%Cry2Aa protein%expression%purify
根据大肠杆菌密码子偏好性对苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)cry2Aa基因进行优化,并合成全长基因,将cry2Aa基因克隆到表达载体pET-44a上,转化到大肠杆菌Rosetta中进行诱导表达,优化表达条件,采用亲和层析和SDS-PAGE胶回收纯化,Western blot鉴定回收产物.结果表明,IPTG浓度为0.50 mmol/L、27℃诱导4h时Cry2Aa蛋白表达量最高,SDS-PAGE胶回收Cry2Aa纯化蛋白所得的产量高于亲和层析法.
根據大腸桿菌密碼子偏好性對囌雲金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)cry2Aa基因進行優化,併閤成全長基因,將cry2Aa基因剋隆到錶達載體pET-44a上,轉化到大腸桿菌Rosetta中進行誘導錶達,優化錶達條件,採用親和層析和SDS-PAGE膠迴收純化,Western blot鑒定迴收產物.結果錶明,IPTG濃度為0.50 mmol/L、27℃誘導4h時Cry2Aa蛋白錶達量最高,SDS-PAGE膠迴收Cry2Aa純化蛋白所得的產量高于親和層析法.
근거대장간균밀마자편호성대소운금아포간균(Bacillus thuringiensis)cry2Aa기인진행우화,병합성전장기인,장cry2Aa기인극륭도표체재체pET-44a상,전화도대장간균Rosetta중진행유도표체,우화표체조건,채용친화층석화SDS-PAGE효회수순화,Western blot감정회수산물.결과표명,IPTG농도위0.50 mmol/L、27℃유도4h시Cry2Aa단백표체량최고,SDS-PAGE효회수Cry2Aa순화단백소득적산량고우친화층석법.
