中华关节外科杂志(电子版)
中華關節外科雜誌(電子版)
중화관절외과잡지(전자판)
CHINESE JOURNAL OF JOINT SURGERY(ELECTRONIC VERSION)
2013年
2期
196-201
,共6页
孟繁钢%何爱珊%张志奇%吴刚%杨子波%林子洪%龙毅%廖威明
孟繁鋼%何愛珊%張誌奇%吳剛%楊子波%林子洪%龍毅%廖威明
맹번강%하애산%장지기%오강%양자파%림자홍%룡의%료위명
骨形态发生蛋白质类%间质干细胞%组织工程%软骨
骨形態髮生蛋白質類%間質榦細胞%組織工程%軟骨
골형태발생단백질류%간질간세포%조직공정%연골
目的 观察比较不同浓度重组人BMP-7对骨髓间充质干细胞复合组织工程支架材料TCP-COL体外构建组织工程软骨的影响.方法 用梯度离心法获取人骨髓间充质干细胞(hMSCs),将扩增的第3代hMSCs以1×107/ml的细胞浓度接种在支架材料TCP-COL上,分为三组进行培养:对照组(成软骨诱导液培养),BMP-7(50)组(成软骨诱导液基础上加入50 ng/ml的BMP-7),BMP-7(100)组(成软骨诱导液基础上加入100 ng/ml的BMP-7).培养2周后进行扫描电镜观察(SEM),苏木素伊红染色(HE),阿尔新蓝染色,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色(IHC),荧光定量PCR(RT-PCR),糖胺多糖定量(GAG quantification assay)研究.结果 扫描电镜与苏木素伊红染色结果显示细胞在TCP-COL生物支架中分布均匀且紧密粘附在材料表面.阿尔新蓝染色,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色,二型胶原(F=76.931,P<0.05),糖胺多糖(F=63.158,P<0.05)荧光定量PCR,糖胺多糖定量(F=8.981,P<0.05)结果显示BMP-7能有效促进人骨髓间充质干细胞复合支架材料TCP-COL体外成软骨,且100 mg/ml的浓度应用效果大于50 mg/ml.但在COL1基因的表达上,BMP-7(50)组和BMP-7(100)组都显著大于对照组(F=34.823,P<0.05).结论 BMP-7能有效促进人骨髓间充质干细胞复合支架材料TCP-COL体外成软骨,且100mg/ml的浓度应用效果大于50 mg/ml,但应注意其促进骨质增生的作用.TCP-COL是一种有应用前景的生物支架材料.
目的 觀察比較不同濃度重組人BMP-7對骨髓間充質榦細胞複閤組織工程支架材料TCP-COL體外構建組織工程軟骨的影響.方法 用梯度離心法穫取人骨髓間充質榦細胞(hMSCs),將擴增的第3代hMSCs以1×107/ml的細胞濃度接種在支架材料TCP-COL上,分為三組進行培養:對照組(成軟骨誘導液培養),BMP-7(50)組(成軟骨誘導液基礎上加入50 ng/ml的BMP-7),BMP-7(100)組(成軟骨誘導液基礎上加入100 ng/ml的BMP-7).培養2週後進行掃描電鏡觀察(SEM),囌木素伊紅染色(HE),阿爾新藍染色,Ⅱ型膠原免疫組織化學染色(IHC),熒光定量PCR(RT-PCR),糖胺多糖定量(GAG quantification assay)研究.結果 掃描電鏡與囌木素伊紅染色結果顯示細胞在TCP-COL生物支架中分佈均勻且緊密粘附在材料錶麵.阿爾新藍染色,Ⅱ型膠原免疫組織化學染色,二型膠原(F=76.931,P<0.05),糖胺多糖(F=63.158,P<0.05)熒光定量PCR,糖胺多糖定量(F=8.981,P<0.05)結果顯示BMP-7能有效促進人骨髓間充質榦細胞複閤支架材料TCP-COL體外成軟骨,且100 mg/ml的濃度應用效果大于50 mg/ml.但在COL1基因的錶達上,BMP-7(50)組和BMP-7(100)組都顯著大于對照組(F=34.823,P<0.05).結論 BMP-7能有效促進人骨髓間充質榦細胞複閤支架材料TCP-COL體外成軟骨,且100mg/ml的濃度應用效果大于50 mg/ml,但應註意其促進骨質增生的作用.TCP-COL是一種有應用前景的生物支架材料.
목적 관찰비교불동농도중조인BMP-7대골수간충질간세포복합조직공정지가재료TCP-COL체외구건조직공정연골적영향.방법 용제도리심법획취인골수간충질간세포(hMSCs),장확증적제3대hMSCs이1×107/ml적세포농도접충재지가재료TCP-COL상,분위삼조진행배양:대조조(성연골유도액배양),BMP-7(50)조(성연골유도액기출상가입50 ng/ml적BMP-7),BMP-7(100)조(성연골유도액기출상가입100 ng/ml적BMP-7).배양2주후진행소묘전경관찰(SEM),소목소이홍염색(HE),아이신람염색,Ⅱ형효원면역조직화학염색(IHC),형광정량PCR(RT-PCR),당알다당정량(GAG quantification assay)연구.결과 소묘전경여소목소이홍염색결과현시세포재TCP-COL생물지가중분포균균차긴밀점부재재료표면.아이신람염색,Ⅱ형효원면역조직화학염색,이형효원(F=76.931,P<0.05),당알다당(F=63.158,P<0.05)형광정량PCR,당알다당정량(F=8.981,P<0.05)결과현시BMP-7능유효촉진인골수간충질간세포복합지가재료TCP-COL체외성연골,차100 mg/ml적농도응용효과대우50 mg/ml.단재COL1기인적표체상,BMP-7(50)조화BMP-7(100)조도현저대우대조조(F=34.823,P<0.05).결론 BMP-7능유효촉진인골수간충질간세포복합지가재료TCP-COL체외성연골,차100mg/ml적농도응용효과대우50 mg/ml,단응주의기촉진골질증생적작용.TCP-COL시일충유응용전경적생물지가재료.