郑州大学学报(医学版)
鄭州大學學報(醫學版)
정주대학학보(의학판)
JOURNAL OF ZHENGZHOU UNIVERISTY(MEDICAL SCIENCES)
2013年
3期
297-300
,共4页
贺红柳%轩小燕%李刚%王志强%宋一民%李蕴蕴%李珊珊
賀紅柳%軒小燕%李剛%王誌彊%宋一民%李蘊蘊%李珊珊
하홍류%헌소연%리강%왕지강%송일민%리온온%리산산
食管鳞状细胞癌%EC-1细胞%pXJ40-Stat3%磷酸化Stat3蛋白%转染
食管鱗狀細胞癌%EC-1細胞%pXJ40-Stat3%燐痠化Stat3蛋白%轉染
식관린상세포암%EC-1세포%pXJ40-Stat3%린산화Stat3단백%전염
目的:建立稳定表达磷酸化Stat3(p-Stat3)蛋白的EC-1细胞株.方法:应用脂质体Lipofectamine 2000将pXJ40-Stat3质粒转染入EC-1细胞中,G418筛选得稳定转染pXJ40-Stat3的EC-1细胞株,IL-6处理20 min以获得稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株(转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组).同时以稳定转染pXJ40-Stat3(转染pXJ40-Stat3组)、IL-6处理组(不转染)、空载体组和空白组细胞作为对照.分别用RT-PCR和Western blot法检测各组细胞中Stat3 mRNA和 p-Stat3蛋白的表达.结果:5组细胞中Stat3 mRNA和 p-Stat3表达差异有统计学意义(FStat3 mRNA=5.971,P=0.010;Fp-Stat3=7.334,P=0.005).转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组EC-1细胞中Stat3 mRNA表达最高(0.72±0.01),其次是转染pXJ40-Stat3组(0.65±0.01),均高于其他3组.转染pXJ40-Stat3+IL-6处理组EC-1细胞中p-Stat3蛋白表达最高(0.72±0.03),其次为IL-6处理组(0.65±0.01),均高于其他3组.结论:成功建立稳定表达p-Stat3蛋白的EC-1细胞株.
目的:建立穩定錶達燐痠化Stat3(p-Stat3)蛋白的EC-1細胞株.方法:應用脂質體Lipofectamine 2000將pXJ40-Stat3質粒轉染入EC-1細胞中,G418篩選得穩定轉染pXJ40-Stat3的EC-1細胞株,IL-6處理20 min以穫得穩定錶達p-Stat3蛋白的EC-1細胞株(轉染pXJ40-Stat3+IL-6處理組).同時以穩定轉染pXJ40-Stat3(轉染pXJ40-Stat3組)、IL-6處理組(不轉染)、空載體組和空白組細胞作為對照.分彆用RT-PCR和Western blot法檢測各組細胞中Stat3 mRNA和 p-Stat3蛋白的錶達.結果:5組細胞中Stat3 mRNA和 p-Stat3錶達差異有統計學意義(FStat3 mRNA=5.971,P=0.010;Fp-Stat3=7.334,P=0.005).轉染pXJ40-Stat3+IL-6處理組EC-1細胞中Stat3 mRNA錶達最高(0.72±0.01),其次是轉染pXJ40-Stat3組(0.65±0.01),均高于其他3組.轉染pXJ40-Stat3+IL-6處理組EC-1細胞中p-Stat3蛋白錶達最高(0.72±0.03),其次為IL-6處理組(0.65±0.01),均高于其他3組.結論:成功建立穩定錶達p-Stat3蛋白的EC-1細胞株.
목적:건립은정표체린산화Stat3(p-Stat3)단백적EC-1세포주.방법:응용지질체Lipofectamine 2000장pXJ40-Stat3질립전염입EC-1세포중,G418사선득은정전염pXJ40-Stat3적EC-1세포주,IL-6처리20 min이획득은정표체p-Stat3단백적EC-1세포주(전염pXJ40-Stat3+IL-6처리조).동시이은정전염pXJ40-Stat3(전염pXJ40-Stat3조)、IL-6처리조(불전염)、공재체조화공백조세포작위대조.분별용RT-PCR화Western blot법검측각조세포중Stat3 mRNA화 p-Stat3단백적표체.결과:5조세포중Stat3 mRNA화 p-Stat3표체차이유통계학의의(FStat3 mRNA=5.971,P=0.010;Fp-Stat3=7.334,P=0.005).전염pXJ40-Stat3+IL-6처리조EC-1세포중Stat3 mRNA표체최고(0.72±0.01),기차시전염pXJ40-Stat3조(0.65±0.01),균고우기타3조.전염pXJ40-Stat3+IL-6처리조EC-1세포중p-Stat3단백표체최고(0.72±0.03),기차위IL-6처리조(0.65±0.01),균고우기타3조.결론:성공건립은정표체p-Stat3단백적EC-1세포주.
