中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2013年
5期
447-451
,共5页
登革病毒%白纹伊蚊中肠%C6/36细胞%受体分子
登革病毒%白紋伊蚊中腸%C6/36細胞%受體分子
등혁병독%백문이문중장%C6/36세포%수체분자
目的 筛选登革Ⅱ型病毒与白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中的连接分子.方法 富集纯化登革Ⅱ型病毒,用12%SDS-PAGE分析提取的C6/36细胞膜蛋白和白纹伊蚊中肠组织总蛋白,将分离胶上的蛋白转于硝酸纤维素膜(PVDF)上,应用病毒覆盖蛋白结合试验(VOPBA)方法筛选白纹伊蚊中肠组织和C6/36细胞中表达连接登革Ⅱ型病毒的分子.结果 白纹伊蚊中肠组织总蛋白经12% SDS-PAGE分离后转膜,分别与纯化的病毒液和阴性对照液孵育,用抗登革病毒单克隆抗体检测,结果显示病毒孵育组在分子量30 kDa的位置有特异性的条带出现,而阴性对照组无此条带;用同样的方法筛选C6/36细胞上表达蛋白,病毒孵育组在分子量30 kDa和40 kDa的位置出现特异条带,而阴性对照组无.结论 VOPBA结果显示分子量为30 kDa的分子在中肠组织与C6/36细胞中都能表达,具有连接登革Ⅱ型病毒的作用,对其氨基酸序列的鉴定和功能分析工作正在进行中.
目的 篩選登革Ⅱ型病毒與白紋伊蚊中腸組織和C6/36細胞中的連接分子.方法 富集純化登革Ⅱ型病毒,用12%SDS-PAGE分析提取的C6/36細胞膜蛋白和白紋伊蚊中腸組織總蛋白,將分離膠上的蛋白轉于硝痠纖維素膜(PVDF)上,應用病毒覆蓋蛋白結閤試驗(VOPBA)方法篩選白紋伊蚊中腸組織和C6/36細胞中錶達連接登革Ⅱ型病毒的分子.結果 白紋伊蚊中腸組織總蛋白經12% SDS-PAGE分離後轉膜,分彆與純化的病毒液和陰性對照液孵育,用抗登革病毒單剋隆抗體檢測,結果顯示病毒孵育組在分子量30 kDa的位置有特異性的條帶齣現,而陰性對照組無此條帶;用同樣的方法篩選C6/36細胞上錶達蛋白,病毒孵育組在分子量30 kDa和40 kDa的位置齣現特異條帶,而陰性對照組無.結論 VOPBA結果顯示分子量為30 kDa的分子在中腸組織與C6/36細胞中都能錶達,具有連接登革Ⅱ型病毒的作用,對其氨基痠序列的鑒定和功能分析工作正在進行中.
목적 사선등혁Ⅱ형병독여백문이문중장조직화C6/36세포중적련접분자.방법 부집순화등혁Ⅱ형병독,용12%SDS-PAGE분석제취적C6/36세포막단백화백문이문중장조직총단백,장분리효상적단백전우초산섬유소막(PVDF)상,응용병독복개단백결합시험(VOPBA)방법사선백문이문중장조직화C6/36세포중표체련접등혁Ⅱ형병독적분자.결과 백문이문중장조직총단백경12% SDS-PAGE분리후전막,분별여순화적병독액화음성대조액부육,용항등혁병독단극륭항체검측,결과현시병독부육조재분자량30 kDa적위치유특이성적조대출현,이음성대조조무차조대;용동양적방법사선C6/36세포상표체단백,병독부육조재분자량30 kDa화40 kDa적위치출현특이조대,이음성대조조무.결론 VOPBA결과현시분자량위30 kDa적분자재중장조직여C6/36세포중도능표체,구유련접등혁Ⅱ형병독적작용,대기안기산서렬적감정화공능분석공작정재진행중.
