CAJ | 학술논문

目的探讨无机砷及其代谢物致细胞中毒及自我修复的相关分子机制.方法从8例6~10岁的健康儿童志愿者中,取包皮组织分离、培养成纤维细胞(Fibroblast),分别以无机砷化合物亚砷酸钠(Sodium Arsenate,Na2AsO2)、二甲基胂酸(Dimethylarsinic arsenical,DMAⅤ)、单甲基胂酸(Monomethylated arsenical,MMAⅢ)进行染毒,混匀分组为4组,即高、中、低剂量染毒组及对照组.在72 h后,MTT法检测皮肤成纤维细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期,Real-Time PCR检测XPA、XPC、PARP1、ERCC3基因的表达水平.结果人真皮成纤维细胞通过MTT比色法检测得出结果:与对照组对比,人真皮成纤维细胞经不同浓度的iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ刺激后,吸光度值发生变化,存在剂量-反应关系(P<0.05);用0 、5、15 、25 μmol/L的iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ的浓度作用人真皮成纤维细胞,G0/G1期细胞比例明显下降(P<0.05),G2/M期和S期细胞比例较对照组明显增加(P<0.05);高、中剂量iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ处理组细胞G1期细胞所占百分数增多,提示细胞在G1期出现阻滞的趋势,G2和S期细胞所占百分数较少.XPA、XPC、PARP1、ERCC3在iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ药物作用下,mRNA在0~15 μmol/L浓度的表达量出现上升趋势,而随着iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ药物作用浓度的增加,在15~25 μmol/L浓度的mRNA表达量显示有下降趋势,有统计学意义(P<0.05).结论低浓度无机砷及其代谢产物对人真皮成纤维细胞增殖,高浓度具有细胞毒性.
목적 탐토무궤신급기대사물치세포중독급자아수복적상관분자궤제.방법 종8례6~10세적건강인동지원자중,취포피조직분리、배양성섬유세포(Fibroblast),분별이무궤신화합물아신산납(Sodium Arsenate,Na2AsO2)、이갑기신산(Dimethylarsinic arsenical,DMAⅤ)、단갑기신산(Monomethylated arsenical,MMAⅢ)진행염독,혼균분조위4조,즉고、중、저제량염독조급대조조.재72 h후,MTT법검측피부성섬유세포증식활성,류식세포술검측세포주기,Real-Time PCR검측XPA、XPC、PARP1、ERCC3기인적표체수평.결과 인진피성섬유세포통과MTT비색법검측득출결과:여대조조대비,인진피성섬유세포경불동농도적iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ자격후,흡광도치발생변화,존재제량-반응관계(P<0.05);용0 、5、15 、25 μmol/L적iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ적농도작용인진피성섬유세포,G0/G1기세포비례명현하강(P<0.05),G2/M기화S기세포비례교대조조명현증가(P<0.05);고、중제량iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ처리조세포G1기세포소점백분수증다,제시세포재G1기출현조체적추세,G2화S기세포소점백분수교소.XPA、XPC、PARP1、ERCC3재iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ약물작용하,mRNA재0~15 μmol/L농도적표체량출현상승추세,이수착iAsⅢ、DMAⅤ、MMAⅢ약물작용농도적증가,재15~25 μmol/L농도적mRNA표체량현시유하강추세,유통계학의의(P<0.05).결론 저농도무궤신급기대사산물대인진피성섬유세포증식,고농도구유세포독성.