中国医药导报
中國醫藥導報
중국의약도보
CHINA MEDICAL HERALD
2013年
14期
26-28,35
,共4页
赵铭%刘冰%王臻%李邦印%张灵霞
趙銘%劉冰%王臻%李邦印%張靈霞
조명%류빙%왕진%리방인%장령하
颗粒裂解肽%突变基因%融合蛋白%原核表达
顆粒裂解肽%突變基因%融閤蛋白%原覈錶達
과립렬해태%돌변기인%융합단백%원핵표체
目的 构建NKG5突变基因的原核表达载体并进行表达研究.方法 采用寡核苷酸合成的方法,拼接成为NKG5-Ser的编码序列,克隆到pGEMT载体上,测序正确后,再切下编码序列连接到质粒pGEX-4T-1中,重组表达载体转化大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG诱导使融合蛋白高效表达.结果 成功获得重组表达载体pGEX-4T-1-NKG5-Ser,转染大肠埃希菌BL21(DE3)pLysS,诱导表达后,SDS-PAGE和免疫印迹反应均显示显示出相对分子量(Mr)为35 kD的蛋白条带,证明融合蛋白表达成功.结论 获得了突变NKG5与GST的融合蛋白,为进一步的工作打下了基础.
目的 構建NKG5突變基因的原覈錶達載體併進行錶達研究.方法 採用寡覈苷痠閤成的方法,拼接成為NKG5-Ser的編碼序列,剋隆到pGEMT載體上,測序正確後,再切下編碼序列連接到質粒pGEX-4T-1中,重組錶達載體轉化大腸埃希菌BL21(DE3)pLysS,用IPTG誘導使融閤蛋白高效錶達.結果 成功穫得重組錶達載體pGEX-4T-1-NKG5-Ser,轉染大腸埃希菌BL21(DE3)pLysS,誘導錶達後,SDS-PAGE和免疫印跡反應均顯示顯示齣相對分子量(Mr)為35 kD的蛋白條帶,證明融閤蛋白錶達成功.結論 穫得瞭突變NKG5與GST的融閤蛋白,為進一步的工作打下瞭基礎.
목적 구건NKG5돌변기인적원핵표체재체병진행표체연구.방법 채용과핵감산합성적방법,병접성위NKG5-Ser적편마서렬,극륭도pGEMT재체상,측서정학후,재절하편마서렬련접도질립pGEX-4T-1중,중조표체재체전화대장애희균BL21(DE3)pLysS,용IPTG유도사융합단백고효표체.결과 성공획득중조표체재체pGEX-4T-1-NKG5-Ser,전염대장애희균BL21(DE3)pLysS,유도표체후,SDS-PAGE화면역인적반응균현시현시출상대분자량(Mr)위35 kD적단백조대,증명융합단백표체성공.결론 획득료돌변NKG5여GST적융합단백,위진일보적공작타하료기출.
