重庆医学
重慶醫學
중경의학
CHONGQING MEDICAL JOURNAL
2014年
9期
1098-1100,1103
,共4页
水凝胶%角膜%生物相容性材料%细胞毒性
水凝膠%角膜%生物相容性材料%細胞毒性
수응효%각막%생물상용성재료%세포독성
hydrogel composite%nanostructures%biocompatible materials%cytotoxicity
目的：通过体外细胞培养试验，对新型的纳米羟基磷灰石／聚乙烯醇（HA／PVA）多孔复合水凝胶人工角膜支架材料的细胞毒性和生物相容性进行研究。方法将试验材料分为4组：大孔径的纳米HA／PVA复合水凝胶、小孔径的纳米HA／PVA复合水凝胶、大孔径的PVA水凝胶及小孔径的PVA水凝胶材料，所有大孔径为200μm ，小孔径为100μm。分别用4组材料的浸渍液培养兔角膜成纤维细胞，空白对照组不加入材料直接在培养基中培养。通过MTT 比色法检测各组吸光值（A），并计算各组细胞相对增值率（RGR），对4组材料的细胞毒性进行评价。同时将兔角膜成纤维细胞在4组材料表面直接培养，进行荧光蛋白转染后，72 h于倒置显微镜下观察各组成纤维细胞在培养板上增殖生长情况，并通过扫描电镜观察成纤维细胞在材料上黏附生长，以及向孔隙内迁移的情况。结果大孔径的纳米 HA／PVA复合水凝胶材料和大孔径的PVA水凝胶材料毒性评分均为1级无细胞毒性。72 h倒置显微镜下培养板每视野细胞计数，大孔径组与空白对照组差异无统计学意义（ P＝0．608）。72 h扫描电镜下观察，大孔径及小孔径纳米 HA／PVA复合材料表面见兔角膜成纤维细胞黏附、生长增殖，同时向材料孔隙内迁徙；每视野细胞计数，组间差异有统计学意义（F＝95．245，P＝0．000），大孔径纳米 HA／PVA 复合材料组细胞黏附显著多于其他组。结论纳米HA／PVA 多孔复合水凝胶材料无明显细胞毒性，同时具有良好的生物相容性，是一种具有良好临床应用前景的人工角膜支架材料。
目的：通過體外細胞培養試驗，對新型的納米羥基燐灰石／聚乙烯醇（HA／PVA）多孔複閤水凝膠人工角膜支架材料的細胞毒性和生物相容性進行研究。方法將試驗材料分為4組：大孔徑的納米HA／PVA複閤水凝膠、小孔徑的納米HA／PVA複閤水凝膠、大孔徑的PVA水凝膠及小孔徑的PVA水凝膠材料，所有大孔徑為200μm ，小孔徑為100μm。分彆用4組材料的浸漬液培養兔角膜成纖維細胞，空白對照組不加入材料直接在培養基中培養。通過MTT 比色法檢測各組吸光值（A），併計算各組細胞相對增值率（RGR），對4組材料的細胞毒性進行評價。同時將兔角膜成纖維細胞在4組材料錶麵直接培養，進行熒光蛋白轉染後，72 h于倒置顯微鏡下觀察各組成纖維細胞在培養闆上增殖生長情況，併通過掃描電鏡觀察成纖維細胞在材料上黏附生長，以及嚮孔隙內遷移的情況。結果大孔徑的納米 HA／PVA複閤水凝膠材料和大孔徑的PVA水凝膠材料毒性評分均為1級無細胞毒性。72 h倒置顯微鏡下培養闆每視野細胞計數，大孔徑組與空白對照組差異無統計學意義（ P＝0．608）。72 h掃描電鏡下觀察，大孔徑及小孔徑納米 HA／PVA複閤材料錶麵見兔角膜成纖維細胞黏附、生長增殖，同時嚮材料孔隙內遷徙；每視野細胞計數，組間差異有統計學意義（F＝95．245，P＝0．000），大孔徑納米 HA／PVA 複閤材料組細胞黏附顯著多于其他組。結論納米HA／PVA 多孔複閤水凝膠材料無明顯細胞毒性，同時具有良好的生物相容性，是一種具有良好臨床應用前景的人工角膜支架材料。
목적：통과체외세포배양시험，대신형적납미간기린회석／취을희순（HA／PVA）다공복합수응효인공각막지가재료적세포독성화생물상용성진행연구。방법장시험재료분위4조：대공경적납미HA／PVA복합수응효、소공경적납미HA／PVA복합수응효、대공경적PVA수응효급소공경적PVA수응효재료，소유대공경위200μm ，소공경위100μm。분별용4조재료적침지액배양토각막성섬유세포，공백대조조불가입재료직접재배양기중배양。통과MTT 비색법검측각조흡광치（A），병계산각조세포상대증치솔（RGR），대4조재료적세포독성진행평개。동시장토각막성섬유세포재4조재료표면직접배양，진행형광단백전염후，72 h우도치현미경하관찰각조성섬유세포재배양판상증식생장정황，병통과소묘전경관찰성섬유세포재재료상점부생장，이급향공극내천이적정황。결과대공경적납미 HA／PVA복합수응효재료화대공경적PVA수응효재료독성평분균위1급무세포독성。72 h도치현미경하배양판매시야세포계수，대공경조여공백대조조차이무통계학의의（ P＝0．608）。72 h소묘전경하관찰，대공경급소공경납미 HA／PVA복합재료표면견토각막성섬유세포점부、생장증식，동시향재료공극내천사；매시야세포계수，조간차이유통계학의의（F＝95．245，P＝0．000），대공경납미 HA／PVA 복합재료조세포점부현저다우기타조。결론납미HA／PVA 다공복합수응효재료무명현세포독성，동시구유량호적생물상용성，시일충구유량호림상응용전경적인공각막지가재료。
Objective To evaluate the biocompatibility of nano-hydroxyapatite/polyvinyl alcohol (n-HA/PVA ) hydrogel com-posite for keratoprosthesis .Methods There were four materials to be evaluated ,big-porous and small-porous n-HA/PVA hydrogel composite ,big-porous and small-porous PVA hydrogel .Every kind of materials was digested in F12 nutrient culture for 24 h to get the materials impregnant .Corneal fibroblasts were cultivated in materials impregnant and through methyl thiazolyl tetrazolium col-orimetry to assay the cytotoxicity .Rabbit corneal fibroblasts were seeded onto the four materials in vitro .Three days later the growth of fibroblasts were observed by inverted microscope and scanning electron microscope (SEM ) .Results The cytotoxicity scores of the materials with big-porous were both grade one .The mean corneal fibroblasts counts on culture were no obvious differ-ence between big-porous materials groups and control group under plate inverted microscope 72 hours later(P=0 .608) .Through scanning electron microscope 72 hours later ,corneal fibroblasts grew well on n-HA/PVA hydrogel composite ,and migrated into the porous of composite materials .The corneal fibroblasts on big-porous n-HA/PVA hydrogel composite were more obviously found than the other three materials(F=95 .245 ,P=0 .000) .Conclusion The porous n-HA/PVA hydrogel composite is a kind of good biocompatible material which has no cytotoxicity .The n-HA/PVA hydrogel composite with big porous would be an ideal pe-ripheral skirt of keratoprosthesis .
