家畜生态学报
傢畜生態學報
가축생태학보
ACTA ECOLOGAE ANIMALIS DOMASTICI
2013年
1期
29-33
,共5页
张辉%宋玲玲%杨宏军%王洪梅%武建明%候佩莉%何洪彬%王立群
張輝%宋玲玲%楊宏軍%王洪梅%武建明%候珮莉%何洪彬%王立群
장휘%송령령%양굉군%왕홍매%무건명%후패리%하홍빈%왕립군
牛传染性鼻气管炎病毒%gD糖蛋白%原核表达%抗血清
牛傳染性鼻氣管炎病毒%gD糖蛋白%原覈錶達%抗血清
우전염성비기관염병독%gD당단백%원핵표체%항혈청
gD糖蛋白是IBRV感染细胞的主要分子,在病毒吸附和侵入宿主细胞中发挥着重要作用.利用IBRV基因组DNA为模板,经生物学软件DNAstar分析主要抗原区,PCR扩增gD基因786 bp片段,定向连接到pET32a(+)表达载体中,筛选阳性克隆转化BL21(DE3)表达菌中,IPTG诱导表达部分可溶的重组蛋白.Ni-NTA非变性纯化系统纯化蛋白,纯化的蛋白免疫新西兰兔制备抗血清,利用间接ELISA法检测抗血清效价为1∶6400;同时以该血清进行血清中和病毒实验,中和指数为1∶640,显示该抗血清具有良好的抗病毒能力,为进一步开发牛传染性鼻气管炎(IBR)的诊断检测试剂和疫苗奠定了重要基础.
gD糖蛋白是IBRV感染細胞的主要分子,在病毒吸附和侵入宿主細胞中髮揮著重要作用.利用IBRV基因組DNA為模闆,經生物學軟件DNAstar分析主要抗原區,PCR擴增gD基因786 bp片段,定嚮連接到pET32a(+)錶達載體中,篩選暘性剋隆轉化BL21(DE3)錶達菌中,IPTG誘導錶達部分可溶的重組蛋白.Ni-NTA非變性純化繫統純化蛋白,純化的蛋白免疫新西蘭兔製備抗血清,利用間接ELISA法檢測抗血清效價為1∶6400;同時以該血清進行血清中和病毒實驗,中和指數為1∶640,顯示該抗血清具有良好的抗病毒能力,為進一步開髮牛傳染性鼻氣管炎(IBR)的診斷檢測試劑和疫苗奠定瞭重要基礎.
gD당단백시IBRV감염세포적주요분자,재병독흡부화침입숙주세포중발휘착중요작용.이용IBRV기인조DNA위모판,경생물학연건DNAstar분석주요항원구,PCR확증gD기인786 bp편단,정향련접도pET32a(+)표체재체중,사선양성극륭전화BL21(DE3)표체균중,IPTG유도표체부분가용적중조단백.Ni-NTA비변성순화계통순화단백,순화적단백면역신서란토제비항혈청,이용간접ELISA법검측항혈청효개위1∶6400;동시이해혈청진행혈청중화병독실험,중화지수위1∶640,현시해항혈청구유량호적항병독능력,위진일보개발우전염성비기관염(IBR)적진단검측시제화역묘전정료중요기출.
