植物资源与环境学报
植物資源與環境學報
식물자원여배경학보
JOURNAL OF PLANT RESOURCES AND ENVIRONMENT
2013年
1期
14-19
,共6页
陶然%任国慧%房经贵%李晓鹏%李阿英
陶然%任國慧%房經貴%李曉鵬%李阿英
도연%임국혜%방경귀%리효붕%리아영
葡萄%(E)-β-丁香烯合酶%Vv-ECar基因%克隆%表达%同源性
葡萄%(E)-β-丁香烯閤酶%Vv-ECar基因%剋隆%錶達%同源性
포도%(E)-β-정향희합매%Vv-ECar기인%극륭%표체%동원성
利用生物信息学方法,通过电子克隆获得葡萄(Vitis vinifera Linn.) (E)-β-丁香烯合酶基因的cDNA序列;以从葡萄品种‘德引84-1’(‘Deyin 84-1’)果肉中提取的mRNA为cDNA模板,利用特异PCR技术克隆得到1个全长1 880 bp的基因,被命名为Vv-ECar(GenBank登录号JF808010),该基因序列包括开放阅读框1 674 bp、3’非翻译编码区209 bp和poly+ (A) 28 bp,可编码557个氨基酸.比对结果显示:葡萄Vv-ECar基因的核苷酸序列与葡萄VvGwECar2基因的同源性达93%,二者编码的氨基酸序列同源性达90.8%,均含有植物萜类合酶家族共有的保守域DDXXD;葡萄Vv-ECar与茶[Camellia sinensis (Linn.)0.Kuntze]和杨(Populus balsamifera subsp.trichocarpa×P.deltoids)的萜类合酶相关基因同源性均在73%以上;分子进化树的分析结果也显示葡萄Vv-ECar基因编码的氨基酸序列与其他植物的同源序列具有高度保守性.半定量RT-PCR和荧光定量PCR分析结果显示:在葡萄果实发育的不同阶段均有Vv-ECar基因的表达,但其相对表达量随果实的发育呈先低后高的趋势,其中在幼果期相对表达量最高.
利用生物信息學方法,通過電子剋隆穫得葡萄(Vitis vinifera Linn.) (E)-β-丁香烯閤酶基因的cDNA序列;以從葡萄品種‘德引84-1’(‘Deyin 84-1’)果肉中提取的mRNA為cDNA模闆,利用特異PCR技術剋隆得到1箇全長1 880 bp的基因,被命名為Vv-ECar(GenBank登錄號JF808010),該基因序列包括開放閱讀框1 674 bp、3’非翻譯編碼區209 bp和poly+ (A) 28 bp,可編碼557箇氨基痠.比對結果顯示:葡萄Vv-ECar基因的覈苷痠序列與葡萄VvGwECar2基因的同源性達93%,二者編碼的氨基痠序列同源性達90.8%,均含有植物萜類閤酶傢族共有的保守域DDXXD;葡萄Vv-ECar與茶[Camellia sinensis (Linn.)0.Kuntze]和楊(Populus balsamifera subsp.trichocarpa×P.deltoids)的萜類閤酶相關基因同源性均在73%以上;分子進化樹的分析結果也顯示葡萄Vv-ECar基因編碼的氨基痠序列與其他植物的同源序列具有高度保守性.半定量RT-PCR和熒光定量PCR分析結果顯示:在葡萄果實髮育的不同階段均有Vv-ECar基因的錶達,但其相對錶達量隨果實的髮育呈先低後高的趨勢,其中在幼果期相對錶達量最高.
이용생물신식학방법,통과전자극륭획득포도(Vitis vinifera Linn.) (E)-β-정향희합매기인적cDNA서렬;이종포도품충‘덕인84-1’(‘Deyin 84-1’)과육중제취적mRNA위cDNA모판,이용특이PCR기술극륭득도1개전장1 880 bp적기인,피명명위Vv-ECar(GenBank등록호JF808010),해기인서렬포괄개방열독광1 674 bp、3’비번역편마구209 bp화poly+ (A) 28 bp,가편마557개안기산.비대결과현시:포도Vv-ECar기인적핵감산서렬여포도VvGwECar2기인적동원성체93%,이자편마적안기산서렬동원성체90.8%,균함유식물첩류합매가족공유적보수역DDXXD;포도Vv-ECar여다[Camellia sinensis (Linn.)0.Kuntze]화양(Populus balsamifera subsp.trichocarpa×P.deltoids)적첩류합매상관기인동원성균재73%이상;분자진화수적분석결과야현시포도Vv-ECar기인편마적안기산서렬여기타식물적동원서렬구유고도보수성.반정량RT-PCR화형광정량PCR분석결과현시:재포도과실발육적불동계단균유Vv-ECar기인적표체,단기상대표체량수과실적발육정선저후고적추세,기중재유과기상대표체량최고.