浙江理工大学学报
浙江理工大學學報
절강리공대학학보
JOURNAL OF ZHEJIANG SCI-TECH UNIVERSITY
2013年
3期
383-388
,共6页
韩文正%武虎%李晓艳%李红艳%姚韵靓%郭科妮%周秀梅
韓文正%武虎%李曉豔%李紅豔%姚韻靚%郭科妮%週秀梅
한문정%무호%리효염%리홍염%요운정%곽과니%주수매
巨噬细胞%LPS%VSV%免疫荧光%IL-6
巨噬細胞%LPS%VSV%免疫熒光%IL-6
거서세포%LPS%VSV%면역형광%IL-6
通过LPS(lipopolysaccharide)分别刺激树突状细胞和巨噬细胞,发现巨噬细胞中HtrA丝氨酸蛋白酶2(HtrA serine peptidase 2,htra2)基因的表达随着刺激时间的延长呈现下调的变化趋势,提示巨噬细胞中的htra2受到LPS的调控.为了进一步证实LPS刺激的特异性,实验建立VSV(vesicular stomatitis virus)病毒感染巨噬细胞模型,采用荧光定量PCR,免疫荧光方法分别从htra2的蛋白水平和定位上研究htra2的变化与LPS刺激巨噬细胞产生效应的相关性；构建了htra2基因过表达的质粒pKH3-htra2-HA,采用ELISA,Western Blot及荧光定量PCR等方法,检测过表达htra2对巨噬细胞产生和分泌炎症因子IL-6(Interleukin-6)及IL-1b(Interleukin-1b)的影响.实验结果表明:htra2仅在LPS刺激巨噬细胞的体系中受到调控,且过表达的htra2会上调巨噬细胞IL-1b和IL-6的表达水平.
通過LPS(lipopolysaccharide)分彆刺激樹突狀細胞和巨噬細胞,髮現巨噬細胞中HtrA絲氨痠蛋白酶2(HtrA serine peptidase 2,htra2)基因的錶達隨著刺激時間的延長呈現下調的變化趨勢,提示巨噬細胞中的htra2受到LPS的調控.為瞭進一步證實LPS刺激的特異性,實驗建立VSV(vesicular stomatitis virus)病毒感染巨噬細胞模型,採用熒光定量PCR,免疫熒光方法分彆從htra2的蛋白水平和定位上研究htra2的變化與LPS刺激巨噬細胞產生效應的相關性；構建瞭htra2基因過錶達的質粒pKH3-htra2-HA,採用ELISA,Western Blot及熒光定量PCR等方法,檢測過錶達htra2對巨噬細胞產生和分泌炎癥因子IL-6(Interleukin-6)及IL-1b(Interleukin-1b)的影響.實驗結果錶明:htra2僅在LPS刺激巨噬細胞的體繫中受到調控,且過錶達的htra2會上調巨噬細胞IL-1b和IL-6的錶達水平.
통과LPS(lipopolysaccharide)분별자격수돌상세포화거서세포,발현거서세포중HtrA사안산단백매2(HtrA serine peptidase 2,htra2)기인적표체수착자격시간적연장정현하조적변화추세,제시거서세포중적htra2수도LPS적조공.위료진일보증실LPS자격적특이성,실험건립VSV(vesicular stomatitis virus)병독감염거서세포모형,채용형광정량PCR,면역형광방법분별종htra2적단백수평화정위상연구htra2적변화여LPS자격거서세포산생효응적상관성；구건료htra2기인과표체적질립pKH3-htra2-HA,채용ELISA,Western Blot급형광정량PCR등방법,검측과표체htra2대거서세포산생화분비염증인자IL-6(Interleukin-6)급IL-1b(Interleukin-1b)적영향.실험결과표명:htra2부재LPS자격거서세포적체계중수도조공,차과표체적htra2회상조거서세포IL-1b화IL-6적표체수평.
