浙江理工大学学报
浙江理工大學學報
절강리공대학학보
JOURNAL OF ZHEJIANG SCI-TECH UNIVERSITY
2013年
3期
372-376
,共5页
袁素敬%梁余培%陈勇毅%章康健
袁素敬%樑餘培%陳勇毅%章康健
원소경%량여배%진용의%장강건
A549细胞株%慢病毒%GFP%Smad2
A549細胞株%慢病毒%GFP%Smad2
A549세포주%만병독%GFP%Smad2
将携带Smad2-Flag基因的慢病毒包装系列质粒转染293T细胞,进行慢病毒包装.用收集并纯化好的慢病毒感染A549细胞,流式分选筛选出GFP阳性的细胞,用Flag抗体和Smad2抗体进行Western blot鉴定.流式分选得到的GFP阳性的A549细胞经Western blot鉴定能高效表达外源Smad2-Flag融合蛋白,同时空载慢病毒处理的GFP阳性细胞并不表达Smad2-Flag蛋白.结果表明成功构建了高效表达Smad2蛋白的A549细胞系,为进一步研究超级干扰素抗肺癌的分子机制奠定了基础.
將攜帶Smad2-Flag基因的慢病毒包裝繫列質粒轉染293T細胞,進行慢病毒包裝.用收集併純化好的慢病毒感染A549細胞,流式分選篩選齣GFP暘性的細胞,用Flag抗體和Smad2抗體進行Western blot鑒定.流式分選得到的GFP暘性的A549細胞經Western blot鑒定能高效錶達外源Smad2-Flag融閤蛋白,同時空載慢病毒處理的GFP暘性細胞併不錶達Smad2-Flag蛋白.結果錶明成功構建瞭高效錶達Smad2蛋白的A549細胞繫,為進一步研究超級榦擾素抗肺癌的分子機製奠定瞭基礎.
장휴대Smad2-Flag기인적만병독포장계렬질립전염293T세포,진행만병독포장.용수집병순화호적만병독감염A549세포,류식분선사선출GFP양성적세포,용Flag항체화Smad2항체진행Western blot감정.류식분선득도적GFP양성적A549세포경Western blot감정능고효표체외원Smad2-Flag융합단백,동시공재만병독처리적GFP양성세포병불표체Smad2-Flag단백.결과표명성공구건료고효표체Smad2단백적A549세포계,위진일보연구초급간우소항폐암적분자궤제전정료기출.
