温州医学院学报
溫州醫學院學報
온주의학원학보
JOURNAL OF WENZHOU MEDICAL COLLEGE
2013年
3期
151-154
,共4页
江文静%杨春光%彭建华%张悦%金坤林
江文靜%楊春光%彭建華%張悅%金坤林
강문정%양춘광%팽건화%장열%금곤림
鼻咽肿瘤%细胞培养技术%雷帕霉素%细胞增殖
鼻嚥腫瘤%細胞培養技術%雷帕黴素%細胞增殖
비인종류%세포배양기술%뢰파매소%세포증식
目的:探讨mTOR信号通路在鼻咽癌细胞中是否激活以及mTOR抑制剂雷帕霉素对细胞增殖的调控作用.方法:利用原代培养的人类鼻咽癌细胞,采用Western blot法和免疫荧光细胞化学法检测人类鼻咽癌细胞中mTOR信号通路活化情况;采用Western blot方法检测不同浓度雷帕霉素作用24 h后细胞中S6,pS6、mTOR、pmTOR蛋白的表达量;同时用CCK8检测雷帕霉素作用24 h后细胞的存活情况.结果:West-ern blot法检测结果显示S6、pS6、mTOR、pmTOR四种蛋白在原代培养的人类鼻咽癌细胞中呈阳性表达.免疫荧光进一步证实mTOR和pmTOR两种蛋白主要表达于鼻咽癌细胞浆中.当雷帕霉素浓度为0~ 100nmol/L时,随着药物浓度增加,四种蛋白的表达量逐渐下降,相应的细胞存活率也逐渐下降.但当雷帕霉素浓度超过100 nmol/L时,药物浓度增加对鼻咽癌细胞增殖抑制的影响无明显变化.雷帕霉素浓度为0和1000 nmol/L时,鼻咽癌细胞的存活率存在较大差异.结论:mTOR信号在人类原发鼻咽癌细胞中呈激活状态,对这些细胞增殖起重要的调控作用.
目的:探討mTOR信號通路在鼻嚥癌細胞中是否激活以及mTOR抑製劑雷帕黴素對細胞增殖的調控作用.方法:利用原代培養的人類鼻嚥癌細胞,採用Western blot法和免疫熒光細胞化學法檢測人類鼻嚥癌細胞中mTOR信號通路活化情況;採用Western blot方法檢測不同濃度雷帕黴素作用24 h後細胞中S6,pS6、mTOR、pmTOR蛋白的錶達量;同時用CCK8檢測雷帕黴素作用24 h後細胞的存活情況.結果:West-ern blot法檢測結果顯示S6、pS6、mTOR、pmTOR四種蛋白在原代培養的人類鼻嚥癌細胞中呈暘性錶達.免疫熒光進一步證實mTOR和pmTOR兩種蛋白主要錶達于鼻嚥癌細胞漿中.噹雷帕黴素濃度為0~ 100nmol/L時,隨著藥物濃度增加,四種蛋白的錶達量逐漸下降,相應的細胞存活率也逐漸下降.但噹雷帕黴素濃度超過100 nmol/L時,藥物濃度增加對鼻嚥癌細胞增殖抑製的影響無明顯變化.雷帕黴素濃度為0和1000 nmol/L時,鼻嚥癌細胞的存活率存在較大差異.結論:mTOR信號在人類原髮鼻嚥癌細胞中呈激活狀態,對這些細胞增殖起重要的調控作用.
목적:탐토mTOR신호통로재비인암세포중시부격활이급mTOR억제제뢰파매소대세포증식적조공작용.방법:이용원대배양적인류비인암세포,채용Western blot법화면역형광세포화학법검측인류비인암세포중mTOR신호통로활화정황;채용Western blot방법검측불동농도뢰파매소작용24 h후세포중S6,pS6、mTOR、pmTOR단백적표체량;동시용CCK8검측뢰파매소작용24 h후세포적존활정황.결과:West-ern blot법검측결과현시S6、pS6、mTOR、pmTOR사충단백재원대배양적인류비인암세포중정양성표체.면역형광진일보증실mTOR화pmTOR량충단백주요표체우비인암세포장중.당뢰파매소농도위0~ 100nmol/L시,수착약물농도증가,사충단백적표체량축점하강,상응적세포존활솔야축점하강.단당뢰파매소농도초과100 nmol/L시,약물농도증가대비인암세포증식억제적영향무명현변화.뢰파매소농도위0화1000 nmol/L시,비인암세포적존활솔존재교대차이.결론:mTOR신호재인류원발비인암세포중정격활상태,대저사세포증식기중요적조공작용.