CAJ | 학술논문

目的:研究甘草查尔酮B(licochalcone B)诱导小鼠黑色素瘤细胞(B16F0)凋亡作用并初步探讨其机制.方法:取对数生长期B16F0细胞按5 000个/孔接种于96孔板中,MTT染色法检测甘草查尔酮B(5,7.5,10,12.5,15 mg·L-1)作用24 h后,对B16F0细胞的增殖抑制作用；取对数生长期B16F0细胞按1×105个/孔接种于6孔板中,甘草查尔酮B(7.5,15mg·L-1)作用24 h后,Hoeehst 33258染色法观察细胞凋亡形态；取对数生长期B16F0细胞按5×105个/瓶接种于细胞培养瓶中,甘草查尔酮B(5,7.5,10,12.5 mg·L-1)作用24 h后,流式细胞仪检测细胞凋亡率；RT-PCR法检测与凋亡相关基因Bcl-2相关X蛋白(Bax),B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2) mRNA表达；荧光法检测半胱氨酸蛋白酶蛋白9(Caspase-9)和半胱胺酸蛋白酶蛋白3(Caspase-3)相对活性.结果:甘草查尔酮B能有效抑制B16F0细胞增殖,作用24 h后对细胞的生长有明显的抑制作用,IC.011.3 mg·L-1,在5～15 mg·L-1表现出明显的剂量依赖,细胞出现明显凋亡特征,随甘草查尔酮B浓度的增加凋亡率逐渐升高；甘草查尔酮B(10,12.5 mg·L-1)能明显下调Bcl-2/Bax,上调Caspase-3,Caspase-9的表达,其中7.5 mg·L-1甘草查尔酮B引起Caspase-9,Caspase-3的活化程度较12.5 mg·L-1高.结论:甘草查尔酮B可能通过激活线粒体调控的凋亡通路诱导B16F0细胞凋亡.
목적:연구감초사이동B(licochalcone B)유도소서흑색소류세포(B16F0)조망작용병초보탐토기궤제.방법:취대수생장기B16F0세포안5 000개/공접충우96공판중,MTT염색법검측감초사이동B(5,7.5,10,12.5,15 mg·L-1)작용24 h후,대B16F0세포적증식억제작용；취대수생장기B16F0세포안1×105개/공접충우6공판중,감초사이동B(7.5,15mg·L-1)작용24 h후,Hoeehst 33258염색법관찰세포조망형태；취대수생장기B16F0세포안5×105개/병접충우세포배양병중,감초사이동B(5,7.5,10,12.5 mg·L-1)작용24 h후,류식세포의검측세포조망솔；RT-PCR법검측여조망상관기인Bcl-2상관X단백(Bax),B림파세포류-2(Bcl-2) mRNA표체；형광법검측반광안산단백매단백9(Caspase-9)화반광알산단백매단백3(Caspase-3)상대활성.결과:감초사이동B능유효억제B16F0세포증식,작용24 h후대세포적생장유명현적억제작용,IC.011.3 mg·L-1,재5～15 mg·L-1표현출명현적제량의뢰,세포출현명현조망특정,수감초사이동B농도적증가조망솔축점승고；감초사이동B(10,12.5 mg·L-1)능명현하조Bcl-2/Bax,상조Caspase-3,Caspase-9적표체,기중7.5 mg·L-1감초사이동B인기Caspase-9,Caspase-3적활화정도교12.5 mg·L-1고.결론:감초사이동B가능통과격활선립체조공적조망통로유도B16F0세포조망.