中国老年学杂志
中國老年學雜誌
중국노년학잡지
CHINESE JOURNAL OF GERONTOLOGY
2013年
9期
2068-2070
,共3页
段现花%王德广%欧阳长杰%曲德伟
段現花%王德廣%歐暘長傑%麯德偉
단현화%왕덕엄%구양장걸%곡덕위
大鼠羊膜上皮细胞%分离%培养%鉴定
大鼠羊膜上皮細胞%分離%培養%鑒定
대서양막상피세포%분리%배양%감정
目的 探讨建立大鼠羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定方法及观察其生物学特性.方法 从妊娠14～ 16 d的SD大鼠胎盘剥离羊膜,用胰蛋白酶消化法分离大鼠羊膜上皮细胞,采用免疫荧光细胞化学和流式细胞仪分析细胞表型特征；使用含有10％胎牛血清(FBS)和100 U/ml青霉素-链霉素(PS)溶液的DMEM/F-12的培养基进行细胞培养.结果 每次采用胰蛋白酶消化法从1只孕鼠分离的上皮细胞数为(1～6) ×105/ml,足够达到贴壁培养浓度.所分离的羊膜上皮细胞表达神经前体细胞特异性蛋白nestin和骨髓间充质干细胞表面标记蛋白CD29和CD44,但是未成熟神经元标记蛋白β-Ⅲ-tublin、星形胶质细胞标记物胶质纤维酸性蛋白(GFAP)以及造血干细胞表面标记蛋白CD34表达阴性.在完全培养基培养条件下,羊膜上皮细胞生长增殖较快,原代培养1 w后即可传代.结论 建立了大鼠羊膜上皮细胞分离、培养及鉴定的方法,大鼠羊膜上皮细胞具有神经前体细胞的特异标志和间充质干细胞的某些表型特征.
目的 探討建立大鼠羊膜上皮細胞分離、培養及鑒定方法及觀察其生物學特性.方法 從妊娠14～ 16 d的SD大鼠胎盤剝離羊膜,用胰蛋白酶消化法分離大鼠羊膜上皮細胞,採用免疫熒光細胞化學和流式細胞儀分析細胞錶型特徵；使用含有10％胎牛血清(FBS)和100 U/ml青黴素-鏈黴素(PS)溶液的DMEM/F-12的培養基進行細胞培養.結果 每次採用胰蛋白酶消化法從1隻孕鼠分離的上皮細胞數為(1～6) ×105/ml,足夠達到貼壁培養濃度.所分離的羊膜上皮細胞錶達神經前體細胞特異性蛋白nestin和骨髓間充質榦細胞錶麵標記蛋白CD29和CD44,但是未成熟神經元標記蛋白β-Ⅲ-tublin、星形膠質細胞標記物膠質纖維痠性蛋白(GFAP)以及造血榦細胞錶麵標記蛋白CD34錶達陰性.在完全培養基培養條件下,羊膜上皮細胞生長增殖較快,原代培養1 w後即可傳代.結論 建立瞭大鼠羊膜上皮細胞分離、培養及鑒定的方法,大鼠羊膜上皮細胞具有神經前體細胞的特異標誌和間充質榦細胞的某些錶型特徵.
목적 탐토건립대서양막상피세포분리、배양급감정방법급관찰기생물학특성.방법 종임신14～ 16 d적SD대서태반박리양막,용이단백매소화법분리대서양막상피세포,채용면역형광세포화학화류식세포의분석세포표형특정；사용함유10％태우혈청(FBS)화100 U/ml청매소-련매소(PS)용액적DMEM/F-12적배양기진행세포배양.결과 매차채용이단백매소화법종1지잉서분리적상피세포수위(1～6) ×105/ml,족구체도첩벽배양농도.소분리적양막상피세포표체신경전체세포특이성단백nestin화골수간충질간세포표면표기단백CD29화CD44,단시미성숙신경원표기단백β-Ⅲ-tublin、성형효질세포표기물효질섬유산성단백(GFAP)이급조혈간세포표면표기단백CD34표체음성.재완전배양기배양조건하,양막상피세포생장증식교쾌,원대배양1 w후즉가전대.결론 건립료대서양막상피세포분리、배양급감정적방법,대서양막상피세포구유신경전체세포적특이표지화간충질간세포적모사표형특정.
