CAJ | 학술논문

目的比较常规低温(4℃及0℃)及零下非结冰温度(-0.8℃)保存L-02肝细胞时Bcl-2/Bax基因和蛋白表达的差异及与低温保存引起细胞凋亡的关系.方法 L-02细胞分为3组:-0.8C组(零下非结冰组),0°C组(0℃非结冰组),4℃组(对照组).低温保存72 h后,分别测定细胞存活率及凋亡率(流式细胞术),检测LDH、ALT释放及凋亡基因Bcl-2与Bax的mRNA及蛋白定量表达并计算Bcl-2/Bax比值.结果零下非结冰组较0℃组及4℃组显著提高了低温保存72 h的L-02细胞存活率[(70.95％±3.33％)vs(65.9％±3.22％)、(61.02％±3.37％),均P＜0.05]；降低了细胞凋亡率[(5.82％±1.68％)vs(8.53％±1.67％)、(9.40％±2.57％),均P＜0.05]；抑制了LDH[(101.50±6.58) U/L vs(127.67±12.09)U/L、(150.13±11.38) U/L,均P＜0.05]与ALT释放[(6.07±0.63) U/L vs (7.00 ±0.60) U/L、(8.63±1.25) U/L,P ＜0.05]；提高了L-02细胞Bcl-2基因mRNA及蛋白表达(均P＜0.05),降低了Bax基因mRNA及蛋白表达(均P＜0.05),Bcl-2/Bax指数上升(均P＜0.05).结论同常规低温保存相比,零下非结冰可显著提高肝细胞低温保存后细胞存活率,降低低温损伤引起的细胞凋亡.零下非结冰降低了低温源性细胞凋亡的机制可能同Bcl-2基因表达增加、Bax基因表达降低即Bcl-2/Bax比值上升有关.
목적 비교상규저온(4℃급0℃)급령하비결빙온도(-0.8℃)보존L-02간세포시Bcl-2/Bax기인화단백표체적차이급여저온보존인기세포조망적관계.방법 L-02세포분위3조:-0.8C조(령하비결빙조),0°C조(0℃비결빙조),4℃조(대조조).저온보존72 h후,분별측정세포존활솔급조망솔(류식세포술),검측LDH、ALT석방급조망기인Bcl-2여Bax적mRNA급단백정량표체병계산Bcl-2/Bax비치.결과 령하비결빙조교0℃조급4℃조현저제고료저온보존72 h적L-02세포존활솔[(70.95％±3.33％)vs(65.9％±3.22％)、(61.02％±3.37％),균P＜0.05]；강저료세포조망솔[(5.82％±1.68％)vs(8.53％±1.67％)、(9.40％±2.57％),균P＜0.05]；억제료LDH[(101.50±6.58) U/L vs(127.67±12.09)U/L、(150.13±11.38) U/L,균P＜0.05]여ALT석방[(6.07±0.63) U/L vs (7.00 ±0.60) U/L、(8.63±1.25) U/L,P ＜0.05]；제고료L-02세포Bcl-2기인mRNA급단백표체(균P＜0.05),강저료Bax기인mRNA급단백표체(균P＜0.05),Bcl-2/Bax지수상승(균P＜0.05).결론 동상규저온보존상비,령하비결빙가현저제고간세포저온보존후세포존활솔,강저저온손상인기적세포조망.령하비결빙강저료저온원성세포조망적궤제가능동Bcl-2기인표체증가、Bax기인표체강저즉Bcl-2/Bax비치상승유관.